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浅谈反射式荧光显微镜

2020.9.08

  荧光显微镜大体上可以分为透射式荧光显微镜和反射式(落射式)荧光显微镜。由于透射式荧光显微镜存在一系列的缺点,现在几乎已经被淘汰了,由更先进的反射式荧光显微镜所代替。

反射式荧光显微镜多用高压汞灯或卤素灯作为光源,所用的物镜必须能够透过足够的紫外光,而且本身不产生荧光,对数值孔径没有限制。而且,它的物镜不仅能作为物镜用,还可以作为聚光镜用。而且它既可以观察厚的标本或不透明的标本都能观察。

    反射式荧光显微镜存在的优点如下:

    1、由于物镜兼做聚光镜,不需要很多调节。

    2、物镜数值孔径不受限制,在高放大倍率时,也可以获得高分辨率的图像。

    3、厚的或不透明的样本也能观察,厚的盖玻片也能使用。

    4、其他观察法也能与反射荧光结合使用,特别是和相差法和投射微分干涉差法结合。

    5、可以避免不必要的荧光色衰退现象。

    当然,它也存在一些缺点,比如在使用低倍率物镜时,像比较暗,因此必须用大数值孔径的物镜。对滤光镜系统也有所要求,要必须能够有效的分离开激发光和荧光。




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