关注公众号

关注公众号

手机扫码查看

手机查看

喜欢作者

打赏方式

微信支付微信支付
支付宝支付支付宝支付
×

诱导式IPTG的浓度应该好多

2022.5.23

有些药物可以抑制细菌的生长,但不见得在蛋白层次明显表现出来。你可以尝试从mRNA水平进行考虑或者转录因子角度进行考虑。mRNA水平的,你可以做mRNA表达谱芯片来看看你的mRNA表达的情况,相信在IPTG的作用下与没有IPTG组对比的mRNA表达是有比较大的差异的。但蛋白的表达就不见得了。
一般是将菌摇到OD600=0.4-0.6,然后加入终浓度1mM的IPTG(这个一般不变,诱导不出来再考虑适当多加点,例如2-5mM),但是诱导时间和诱导温度根据诱导蛋白大小、性质的不同而不同,需要摸索的,你可以做个预实验,隔两个小时取样,最后SDS-PAGE,寻找合适诱导时间,如果不想这么麻烦,直接过夜诱导.诱导温度的话一般20-30℃的都有,我同学有次用16℃诱导出来的.

推荐
关闭