LSCM的荧光标记
传统应用于荧光标记的染料如异硫氰酸荧光素(fluorescin isothiocyanate,FITC,ex 490 nm/em520 nm)、四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC,ex 550 nm/em 620 nm)、罗丹明(Rhodamine,ex 560 nm/em 540 ~ 660 nm)、四甲基罗丹明(tetramethylrhodamine,TMR,ex 570 nm/em 595 ~ 600 nm)、德克萨斯红(Texas red,ex 592 nm/em610 nm)、氨甲基香豆素(Aminomethylcoumarin acetic acid,AMCA,ex 345nm/em425 nm)等,结合激光共聚焦显微镜技术的发展,这些经典的荧光染料逐渐被层出不穷的新的荧光染料所替代。如 Cyanine 类荧光染料,其中 Cy3(ex554 nm/em568 nm)的激发峰值更接近于新型固体 561 nm 激光器,且比 TRITC 等更亮、更稳定,已 被广为应用于免疫荧光抗体标记;Alexa Fluor 系列荧光染料激发和发射光谱窄,可用于多重荧光标记而更少光谱重叠;ATTO 系列荧光染料具有较强的光稳定性和热稳定性,已被应用于 STED(Stimulated Emission Depletion 受激发射损耗)超高分辨率显微成像技术[;DyLigh、CF等更多新型荧 光染料系列都将因其较高的激发效率、良好的光稳 定性、宽泛的 PH 稳定性等优越的特性而被广泛的 应用于组织及细胞免疫荧光标记。