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PCR反应实验操作注意事项

2019.3.02

SSR分子标记实验:   PCR反应实验操作注意事项:

PCR 反应过程中应特别注意不要使样品相互污染, 以免造成试验结果不准确, 同时也要注意所加试剂或样品必须是经过混匀后的液体, 这样才能保证反应液各成分的浓度和体积的均一性 所用试剂需从正规商家购进, 以保证试剂的质量。

BEAS-2B细胞 人正常肺上皮细胞
Bcap-37细胞 人乳腺癌细胞
B95-8细胞 绒猴EBV转化的白细胞
B16-F10细胞 小鼠皮肤黑色素瘤细胞
( 1) 尽量使用一次性手套 专用整套移液器 成套试剂和其他必需品, 避免外来 DNA 污染反应体系( 2) DNA 模板应稀释为适宜的浓度, 使加入 PCR反应的 DNA 样品体积zui好在 4 ~ 5 l 如果 DNA 模板样品量太少, 仅有1 ~ 2 l, 不仅实验操作难度大, 而且如果操作时间长, 会导致 DNA 反应液部分或全部蒸发掉, 影响 PCR 反应结果。

293T细胞人胚肾细胞
293T/17细胞 人胚肾细胞
2V6.11细胞 人胚肾细胞
3T3-L1细胞 小鼠胚胎成纤维细胞
4T1细胞 小鼠乳腺癌细胞
( 3) 可以先将 DNA 样品加到 PCR 管底部, 再加其他 PCR 反应混合液 加样时选择不同的方位加 DNA模板和其他 PCR 反应混合液, 这样枪头靠壁加样时不会交叉污染。
( 4) 加样完毕后, 盖上盖子, 混匀反应液, 再低速离心片刻( 1 min 左右) 如果不是立即进行 PCR 扩增, 需将 PCR 反应混合液置于 - 20 ℃保存备用。

WISH细胞,人羊膜细胞
Y1细胞,小鼠肾上腺皮质细胞
YAC-1细胞,小鼠淋巴瘤细胞
ZR-75-1细胞,人乳腺癌细胞
ZR-75-30细胞,人乳腺癌细胞
( 5) PCR 扩增反应使用的酶不能长时间放置于室温下, 须随用随取, 使用完毕后立即放回 - 20 ℃冰箱否则, 酶易失活。
( 6) PCR 反应的退火温度应根据不同的引物来确定zui佳退火温度, 以确保扩增的条带中杂带少, 目标带明显, 引物退火温度一般按照 Tm = 4 ℃( G + C) + 2 ℃( A + T) 公式计算。

TE-10细胞,人食管癌细胞
TE-1细胞,人食管癌细胞
Tca-8113细胞,人舌鳞癌细胞
T-47D细胞,人乳腺管癌细胞
T24细胞,人膀胱移行细胞癌细胞
WEHI 231细胞,小鼠B 淋巴细胞
WI-38细胞,人胚肺细胞
293细胞 人胚肾细胞
5637细胞人膀胱癌细胞
6T-CEM细胞 人T细胞白血病细胞
769-P细胞 人肾细胞腺癌细胞
786-0细胞 人肾透明细胞腺癌细胞
95-D细胞人高转移肺癌细胞
A172细胞人胶质母细胞瘤细胞
A3细胞 人T淋巴细胞白血病细胞
J82细胞人膀胱移行细胞癌
A-431细胞 人表皮癌细胞
A549细胞人非小细胞肺癌细胞
A-673细胞 人横纹肌瘤细胞
A7r5细胞 大鼠胸大动脉平滑肌细胞
A9细胞 小鼠皮下结缔组织细胞
AAV-293细胞 人胚肾细胞
Acc-2细胞人涎腺腺样囊性癌细胞
Acc-3细胞人涎腺腺样囊性癌细胞
ACHN细胞 人肾细胞腺癌细胞
AGS细胞 人胃腺癌细胞
AML-193细胞 人急性单核细胞白血病单核细胞
Ana-1细胞 小鼠巨噬细胞
AR42J细胞大鼠胰腺外分泌细胞
AsPC-1细胞 人转移胰腺腺癌细胞
AtT-20细胞 小鼠垂体瘤细胞
B16细胞 小鼠黑色素瘤细胞
BxPC-3细胞 人原位胰腺腺癌细胞
BT-549细胞 人乳腺管癌细胞
BT474细胞 人乳腺导管癌细胞
BRL 3A细胞 大鼠肝细胞
BRL细胞 大鼠肝细胞
BNL CL.2细胞 小鼠胚胎肝细胞
BGC-823细胞 人胃腺癌细胞
Beta-TC-6细胞 小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞
BEL-7405细胞 人肝癌细胞
BEL-7404细胞 人肝癌细胞
BEL-7402细胞 人肝癌细胞


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