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用萝卜子叶增重法测定细胞分裂素类物质的浓度或效价

2019.11.15

实验方法原理:细胞分裂素有促进萝卜子叶增大的效应,其主要原因是促进细胞分裂和扩大。在一定浓度范围内(6-BA激动素为0.05到50pp M ),子叶增重与浓度成线性关系。

实验材料:萝卜种子  

试剂、试剂盒:次氯酸钠溶液

仪器、耗材:

培养皿                                                                 

滤纸                                                                  

镊子                                                                  

搪瓷盘                                                                  

移液管

实验步骤:

一、材料与设备

大小均匀的萝卜种子

9cm 培养皿,滤纸,镊子,搪瓷盘,移液管:5  ml  2支,0.5  ml  1支

药品

0.5%次氯酸钠溶液

100pp M 激动素溶液:10.000 M g激动素用少量0.1NHCl溶解(如不溶解,可用水浴锅加热),定容至100  ml 。

二、实验步骤

1.将萝卜种子消毒后用蒸馏水洗干净,然后在垫有湿滤纸的搪瓷盘上薄薄地摊开,盖上盖,在25℃黑暗中催芽约30小时。催芽过程中应保持搪瓷盘湿润。

2.从催芽后的每个幼苗上用镊子取下较小的一片子叶,子叶上一定不能带有下胚轴。选取大小一致的子叶50片。每10片为一组,分别称重。

3.取直径9cm 的培养皿5套,垫上一张与皿底大小一致的滤纸,编号。从1-4按倍比方式分别配成50,5,0.5,0.05pp M 的激动素溶液4.5  ml ,5号加入蒸馏水4.5  ml ,每皿内放入10片子叶,盖上盖,然后在25℃的湿润条件下用荧光灯照射培养三天。

4.将子叶取出,用滤纸吸去其表面的水分,立即用万分之一天平称每皿10个子叶的重量。

三、结果

以子叶增重值为纵坐标,激动素浓度对数为横坐标,画出激动素浓度与子叶重量的关系曲线。用同样方法可测出未知样品中的细胞分裂素含量相当于多少含量的激动素。


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