杂菌总数的测定(一)

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杂菌总数的测定(一)
关键词:有证标准物质  食品农药残留检测  环保标准样品  进口标准物质
   杂菌总数是指1 mL(1 g)样品中在一定条件培养后,所得的细菌菌落总数。杂菌总数的测定可以判定样品污染程度,同时可以观察细菌在样品中的繁殖动态,为被检样品进行正确的卫生学评价提供依据。
    1.仪器
    ①l、5、10 mL吸量管。
    ②培养皿(平皿)。
    ③试管与锥形瓶。
    仪器均需高压灭菌。
    2.试剂
    ①0.9 %NaCl生理盐水。
    ②培养基的配制:蛋白胨l %,牛肉膏0.5%,氯化钠0.5%,琼脂2%,pH7.2~7.4,装入灭菌试管中约15 mL,高压灭菌后,保温45℃备用。
    3.操作
    ①样品稀释及培养:在无菌操作条件下,用10 mL无菌吸管吸取样品10 mL。注入90mL无菌生理盐水中,充分摇匀,制成1:10的稀释液。
    ②用l mL灭菌吸管,吸取l:10稀释液1 mL,注人含有9 mL的无菌生理盐水的试管内,振摇试管,使其混合均匀,制成l:100的稀释液。
    ③取l mL无菌吸管,按上次操作顺序10倍递增稀释,每递增稀释一次,即换用1只1mL无菌吸管。配成1:1 000和1:l0 000的稀释液。
    ④分别吸取1:100、1:1 000、1:l0 000的稀释液各l mL注人平皿内,每个稀释度做2个平皿。
⑤立即将15 mL已冷却至45℃的培养基倾注入平皿内,并转动平皿使其混合均匀。
⑥另用1只不加检样,只倾注营养琼脂培养基的平皿作空白对照。
⑦待琼脂凝固后,用纸包好,翻转平皿,置于37℃恒温箱内培养24 h后取出,查出平皿内的菌落数并乘以稀释倍数,即得每毫升样品所含菌落总数。
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