[求助]HUVEC细胞形态改变，请高手指点

最新回复

• 小鱼鱼 (2012-3-08 16:01:19)

  
  圆形细胞应该是死细胞。
  你的细胞长得太密了，传代时可以少留些细胞。

• yes4 (2012-3-08 16:01:41)

  
  传代的时候我都舍不得丢细胞···觉得1传3应该是可以了的。那下次我再丢掉部分细胞看看。
  
  另外还要问细胞的那些小白点是什么呢？我另外一种细胞也有这种小白点，能快速运动向细胞靠近，别人说是支原体污染···保险起见把细胞仍了。这瓶里面也有，但是我观察了很久小白点都没有运动迹象，所以拿不准是不是污染？不过细胞还是长的很快的····

• 小鱼鱼 (2012-3-08 16:01:59)

  
  如果小白点不会动而且不会增多的话就应该不是污染。

• one (2012-3-08 16:02:28)

  
  我也看到过这种情况，应该不是污染，可能是本身细胞的高折光性的东西吧，你看你第1张图也有啊

• vvmmoy (2012-3-08 16:03:30)

  
  不能完全排除污染情况，往往出现污染必须在显微镜下仔细观察才能断定

• 101010 (2012-3-08 16:04:01)

  看小白点是否增多，如有增多，很有可能就是污染了

• nn255 (2012-3-08 16:04:33)

  LZ 是HUVEC的细胞株吧，我们也有遇到这种情况，原代好像没有。

• qhyu (2012-3-08 16:04:53)

  细胞碎片比较多，但是应该还是好的，建议在传代前，吸弃旧培养后，用温的PBS冲洗下细胞之后，在搁酶消化，离心后再种植，细胞密度有点密！

• woshituzhu (2012-3-08 16:05:23)

  我们用的是ECM+5%FBS+1%ECGS培养基，貌似DMEM不给力的，你的细胞的确长得太密了

• zhezhe (2012-3-08 16:05:43)

  有可能是真菌污染，建议加两性霉素。应该用20%FBS

• 兔唇 (2012-3-08 16:06:02)

  
  细胞可能有点衰老了。

• 兔唇 (2012-3-08 16:06:28)

  
  你的细胞不是原代的吧？可能是ECV304。ECV304会发生这种情况。

• 3648755 (2012-3-08 16:06:50)

  
  以我的经验，细胞养着养着发生形态改变，并且有细细的小渣子，但细胞又不会在短时间内死亡(因为支原体污染的发发作有时候是有一定的潜伏期的，并且在早期不会影响细胞生长)，非常有可能是支原体污染，建议用抗生素处理一下。

• eric930 (2012-3-08 16:07:09)

  
  HUVEC增殖非常快，一般想要3天传代一次的话，只能留1比6到1比8左右，然后推荐是用ScienCell的ECM培养基来培养，细胞株最多使用到第7代，之后还可以用，但是敏感度已经不够了，形态发生变化是正常的，圆形为死细胞，为避免形态变细长需及时传代，不能长太满，不能传太多代

• is2011 (2012-3-08 16:07:56)

  你的第二张图片是对的，人脐静脉内皮细胞应该就是那个样子，长满了像铺路石一样，但是你的细胞看起来比较脏，你可以在传达之前用预热的PBS清洗两遍，另外注意消化的时间如果消化过头了就会出现很多细胞碎片，搞清楚你的胰酶里面有没有EDTA如果有的话消化的时间要短，而且随着传代的次数增加消化时间越来越短。

• leifengta (2012-3-08 16:10:17)

  请问各位的HUVEC是从哪里买的啊 有北京的战友吗 我现在急需要一株？不知道大家从哪里买的？或者施舍一瓶也行啊。。拜托 啊 。。。。

• 831226 (2012-3-08 16:10:41)

  
  多谢各位高手的回答，我一般都是1传3或者1传4,1天半到2天就消化传代一次，但是细胞还是长得很快很满···

• woshituzhu (2012-3-08 16:11:54)

  
  细胞密度太密了吧，都长满了，我试过有部分细胞加PS后传代几次都就会变圆，后来不加就好了，可以不加PS试试，也可能跟水质有关。如果觉得是支原体污染的话，可以加用Plasmocin试一下。
  
  细胞长得快我们试过减少血清浓度也ok。

• redbutterfly (2012-3-08 16:12:26)

  应该是长的太满了。是否污染，还需要进一步检测才知道。