流式细胞仪仪器的操作和使用

2018年7月13日 13:14:49 来源: 互联网
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流式细胞仪是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器,它只能测量一个细胞的诸如总核酸量,总蛋白量等指标,而不能鉴别和测出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是说,它的细节 分辨率为零。
  流式细胞仪仪器的操作和使用
  ①打开电源,对系统进行预热;
  ②打开气体阈,调节 压力,获得适宜的液流速度;开启光源冷却系统;
  ③在样品管中加入去离子水,冲洗液流的喷嘴系统;
  ④利用校准标准样品,调整仪器,使在激光功率、光电倍增管电压、放大器电路增益调定的基础上,0和90散射的荧光强度强,并要求变异系数为小;
  ⑤选定流速、测量细胞数、测量参数等,在同样的工作条件下测量样品和对照样品;同时选择计算机屏上数据的显示方式,从而能直观掌握测量进程;
  ⑥样品测量完毕后,再用去离子水冲洗液流系统;
  ⑦因为实验数据已存入计算机硬盘(有的机器还备有光盘系统,存贮量更大),因此可关闭气体、测量装置,而单独使用计算机进行数据处理;
  ⑧将所需结果打印出来。
  流式细胞仪操作和使用中的注意事项
  1)光电倍增管要求稳定的工作条件,暴露的较强的光线下以后,需要较长时间的“暗适应”以消除或降低部分暗电流本底才能工作;另外还要注意磁屏蔽;
  2)光源不得在短时间内(一般要1h左右)关上又打开;使用光源必须预热并注意冷却系统工作是否正常;
  3)液流系统必需随时保持液流畅通,避免气泡栓塞,所使用的鞘流液使用前要经过过滤、消毒;
  4)注意根据测量对象的变换选用合适的滤片系统、放大器的类型等;
  5)特别强度每次测量都需要对照组。

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