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高效液相色谱仪检测猪尿中盐酸克伦特罗的含量

2020.1.08

1.仪器和试剂

高效液相色谱法(hplc)与紫外探测器。

超声波水浴,

离心机:4000分/分,

恒温水浴。

乙醇、乙醚、0.01摩尔/升磷酸二氢钠溶液;

2mol/l氢氧化钠溶液:20g氢氧化钠(极好的纯),可溶于250毫升水;

无水硫酸钠。

除说明外,所有试剂均为纯分析试剂。

盐酸克伦特罗标准溶液:储备溶液,500ug/ml:5毫克克伦特罗盐酸盐溶于超纯水,加入甲醇lml,再以超纯水10ml设定容量;

工作液:储存的标准液体被稀释成2.0 ug/ml工作标准液体,用超纯水分两步。

2.样品处理

在125毫升的漏斗中排出10米的猪粪,将ph值调整为11至12(约8滴),用2mol/ml的纳米溶液,用30、25毫升乙醚抽出两次,每次摇动2分钟。分层后,通过无水硫酸钠漏斗(2至3s)将乙醚层(上层)放入100毫升蒸发盘中。然后用少量的己醚清洗剪接漏斗,冲洗无水硫酸钠。将洗液放入蒸汽碟中,将蒸汽碟放在水面(约60°c)上蒸发蒸发,然后用60%乙醇溶液将残渣洗净3次。将其放入容器瓶中,并设置容量2ML,然后用0.5微米双膜过滤器离心,用高效液相色谱法测定。

3.色谱条件

光谱柱:c18,200毫米×4.6毫米,探测波长:243纳米;柱温:28°c;

注:20 ul;

流动相:0.01m ol/l磷酸二氢钠+甲醇=67+33

流量:0.8毫升/分钟。

根据上述色谱条件,采用外部标准方法对保留时间进行了表征,结果通过盐酸克伦特罗的特征紫外吸收光谱对样品的扫描光谱进行了证实,然后通过样品峰值面积与标准峰值面积的比较,计算出盐酸克伦特罗的含量。


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