免疫学技术专题:组织病理实验(一)
标签: 组织病理
组织学技术包括、组织学制片技术、胚胎学制片技术、组织化学技术、荧光组化及免疫组化技术、组织培养技术、各种特殊显微技术、电镜组织学技术。组织学技术不但应用于组织学本学科,并且广泛应用于其他多学科,如生物学、解剖学、病理学、肿瘤学、法医学、临床诊断学等。
实验方法
石蜡切片法
冰冻切片
实验方法原理 | 石蜡切片是最基本的切片技术,冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。苏木素与伊红对比染色法(简称H.E.对染法)是组织切片最常用的染色方法。这种方法适用范围广泛,对组织细胞的各种成分都可着色,便于全面观察组织构造,而且适用于各种固定液固定的材料,染色后不易褪色可长期保存。 |
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实验材料 | 小鼠 |
试剂、试剂盒 | 中性福尔马林固定液 酒精 二甲苯 石蜡 蜂蜡 苏木精染液 伊红酒精溶液 盐酸酒精溶液 甘油蛋白粘片剂 中性树胶 卡诺固定液 |
仪器、耗材 | 切片机 恒温箱 蜡杯 酒精灯 解剖剪 培养皿 镊子 单面刀片 包埋盒 染色缸 盖玻片 载玻片 玻片盘 显微镜 温度计 水浴锅 |
实验步骤 | 一、材料准备:
甲醛(37%-40%,市售,本所购买即为此浓度)100 mL 磷酸氢二钠6.5 g 磷酸二氢钾(钠)4 g 双蒸水900 mL
盐酸1份 70%酒精100份
蛋白50 ml 甘油50 ml 水杨酸钠(防腐剂)1 g
二、实验步骤:
2. 固定
3. 洗涤
5. 透明
(2)由于乙醇与石蜡不相溶,而二甲苯既能溶于乙醇又能溶于石蜡,所以脱水后还要经过二甲苯以过渡。
6. 透蜡
7. 包埋
8. 切片
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