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固相萃取仪基本原理及操作流程简略表明

2020.6.30

  固相萃取是这种试品预备处理仪器设备,应用液-固相色谱基础理论,选用可选择性吸咐、洗白的方法对试品开展含有、分离出来、清洁解决,使试品更为纯粹,进而减少试品中残渣对检验的干挠,进一步提高检验的精确性。

  固相萃取原理是运用可选择性吸咐与可选择性洗白的液相色谱仪法分离出来基本原理。较常见的方式 是使液體试品水溶液根据催化剂载体,保存在其中被测化学物质,再采用适度抗压强度有机溶剂冲去残渣,随后用小量有机溶剂快速洗白被测化学物质,进而超过迅速分离出来清洁与萃取的目地。固相萃取还可以将其类似地当作这种简易的色谱分析分离出来全过程。

  下边就以郑州市宝晶随着电子有限责任公司的YGC-8数控机床全自动固相萃取仪简易详细介绍固相萃取仪的操作步骤及流程:

  1. SPE小柱或滤膜挑选

  SPE 小柱或滤膜的尺寸与规格型号应视试品中待测物的浓度值尺寸而定。针对浓度值较低的身体试品, 通常应取用要少的固定不动相填充料提纯很大容积的试品。

  2. 活性

  提纯前先加填满小柱的溶剂清洗小柱或用5-10ml 溶剂清洗滤膜使SPE 填充料维持潮湿, 由于填充料干躁会减少试品保留值,而各小柱的干躁水平不同,也会危害利用率的再现性。先加乙醇等水溶溶剂清洗填充料, 由于乙醇能湿润催化剂载体表层, 并渗入非旋光性的硅橡胶键合看中, 使硅橡胶更非常容易被水湿润;随后再添加水或缓冲液清洗,造就和试品溶剂相溶的自然环境并提升利用率。

  3. 上样

  通常可采用下列几种方式 :

  (1) 用0.1mol/L 酸或碱调整, 使pH<3或pH>9, 抽滤取顶层液提纯;

  (2)用乙醇、乙腈等沉定蛋白后取上清液, 以水或缓冲液稀释液后提纯;

  (3)用酸或无机盐沉定蛋白后取上清液, 调整pH 值后提纯;

  (4)超声波15min后添加水、缓冲液, 取上清液提纯。水流量应操纵为1ml/min, 水流量快不利待测物与固定不动紧密结合。

  4. 淋洗

  反相SPE的清理溶剂多见水或缓冲液, 可在清洁液中添加小量溶剂、无机盐或调整pH值。添加小柱的清洁液应不超出1个小柱的容量, 而SPE滤膜为5~10ml。

  5. 洗白

  应取用5~10ml离子强度较差但能洗下待测物的洗白溶剂。如要较高灵敏, 则应先将洗白液挥干后, 再用流动性相资产重组残留后入样。身体试品洗白后多带有水, 可采用冷冻干燥法。保存工作能力较差的SPE 填充料能用小容积、较差的洗白液洗下待测物,再用旋光性极强的HPLC 剖析柱如C18柱剖析洗白物。若待测物可电离, 可调整pH 值, 抑止试品离子化, 以提高待测物在反相SPE 填充料中的保存, 洗白时调整pH值使其离子化合用较差的溶剂洗白, 搜集洗白液后再调整pH值使其在HPLC剖析中提高分离出来实际效果。在洗白全过程中应缓减水流量,用2次小容积洗白替代一回大容积洗白, 利用率更高。

  文章链接:仪器设备网 https://www.instrumentsinfo.com/technology/show-1277.html


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