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重点农业检测技术(二)

2019.9.11

(2)常规化分析法

采用常规化学分析方法也可开展农药残留检测。这类方法不需要特殊的分析仪器、操作简单、费用少,但准确性和精确度低,灵敏度差,因此较适用于大样本的筛查、定性分析或粗略定量测定。

①分光光度法

根据物质对光的吸收特征和吸收强度,对物质进行定性和定量分析。只适用于一些能在某些条件下产生或转变成有色物质的农药的检测,如水果中乙硫磷的检测。

②薄层层析法(TLC)

采用硅胶、氧化铝、聚酰胺等吸附性和环己烷+己烷+四氯化碳+乙酸乙酯等常用展开剂,进行薄层层析,根据样品和标准样相互对照的比移值Rf来定性测定农药残留。已应用于蔬菜中某些有机磷农药残留检出与定量测定。80年代后发展起来的高效薄层色谱法( HPTLC)与扫描技术结合,可进行农药残留的半定量分析,目前可用薄层扫描仪或采用联机形式进行较准确的测定。

③纸色谱法

以纤维纸作载体,以吸附水分为固定相的一种液相色谱法。需要样品少,能同时分离分析多种组分,但操作费时,谱带不够清晰,展开条件难以再现,且只能定性或半定量分析。

(3)快速检测法

利用各种原理对农药残留进行现场大样品的快速检测,是目前保证农产品质量安全的一项重要举措。

①生物化学法(酶法)

利用某种酶受影响的程度来检测农产品中农药残留量。如利用农药靶标酶——乙酰胆碱酯酶(ACHE)的受抑制程度,可检测有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂残留,具体方法为:将酶置于薄层色谱板、纸片或者试管中,当酶与样品混合并提供合适条件时,酶促使底物进行反应,产物本身具有颜色或通过显色剂显色;而如果样品中存在农药残留时,因酶活性受到农药抑制,底物不反应而无产物,故不显色。采用薄层或纸片时,通过显色程度或斑点大小、称重、溶出法可以进行定性或半定量分析,采用试管时,可应用比色法以吸光度值计算酶抑制率,来进行定性或半定量分析,目前已开发出相应的各种速测卡和速测仪。酶法具有快速方便、前处理简单、无需仪器或所需仪器简单等优点,适用于现场的定性和半定量测定,但只能测定有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂,其灵敏度与所使用的酶、显色反应时间和温度密切相关。经酶法检测出阳性后,需按国家标准检验方法进一步检则,以鉴定残留农药品种及其准确残留量。

②免疫分析法

90年代优先研究开发利用的农药残留分析技术,有放射免疫分析( RIA).酶免疫分析( EIA),多组分分析物免疫分析(MIA),免疫传感器分析等。其中以酶免疫分析中的酶联免疫法( ELISA)最为常用,即利用化学物质在动物体内能产生免疫抗体的原理,将小分子农药化合物与大分子生物物质结合成大分子,并使之在动物体内产生抗体,对抗体筛选制成试剂盒,通过抗原与抗体之间发生的酶联免疫反应,依靠比色来确定农药残留。免疫分析法具有特异性强,灵敏度高,方法快捷,无前处理或前处理简单,分析容量大,成本低,一般不需贵重仪器等优点,试剂盒可广泛用于现场样品和大量样品的快速监测,可准确定性和定量;但抗体制备困难,对未知样品具有一定盲目性,可能出现假阳性或假阴性现象,试剂或仪器及环境条件等对定量分析结果影响较大。美国已有成品酶联免疫试剂盒出售,对有机磷和氨基甲酸酯类农药的最小检出浓度分别为20ng/kg和300ng/kg(MRL的一半)。国外的成品试剂盒检测对象包括二恶英、多氯联苯等9种工业废物,六六六、滴滴涕、杀螟硫磷、地亚农、对硫磷等15种杀虫剂,瑞毒霉、腐霉利等4种杀菌剂,2,4-D、甲草胺等16种除草剂。试剂盒既有使用测试管而需配套分光光度计检测的,也有使用针对大量样品检测的多孔板型而配套酶标仪进行检测的。近年来,中国农业大学研究出阿维菌素、三氮苯类除草剂莠去津、西玛津、扑草净等抗体,农业部环境保护研究所研究了对硫磷抗体,但均未克隆,故尚未成正式产品。据悉浙江大学已研究了呋喃丹抗体,并已开发成功单克隆抗体。

从上可以得知,对同一指标(或参数)的检测,可以有多种方法,也可以用不同的检测设备,只是不同的方法和设备对检测结果的影响不同,有的准确度和精密度都高,有的就相对要差一些。在农产品检测实践中,要考虑检测的目的和检测的程度,来选用不同的方法和检测设备,由于检测方法和手段的多样性,检测体系的建设就存在复杂性。


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