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胆碱酯酶的测定实验_pH 稳定计法

2019.3.31
实验材料

胆碱酯酶

试剂、试剂盒

Tris-HCl氯化乙酰胆碱氯化镁NaOH

仪器、耗材

自动滴定器

实验步骤



空白对照:保持 pH 7.4,持续记录几分钟每次 0.01 mol/L 氢氧化钠的用量。


样品:加入酶溶液(例如 0.1~1 ml),保持 pH 7.4,并记录 5 min 每次 0.01 mol/L 氢氧化钠的用量。


计算 25℃ pH 7.4 时,每分钟一个单位水解的 1 umol 乙酰胆碱。

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注意事项
其他


试剂:


0.02 mol/L Tris-HCl,pH7.4


2.2 mol/L 氯化乙酰胆碱(Mr=181.7;40 g 溶于 100 ml 水中,碘化丁酰胆碱,Mr=301.2)


0.2 mol/L 氯化镁(MgCl·6H2O;Mr=203.3;4.1 g 溶于 100 ml 水中)


0.01 mol/L 氢氧化钠标准溶液作为滴定剂,加入自动滴定器的滴管中


胆喊酯酶,溶于 H2O 中,1 mg/ml

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