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L型细菌分离琼脂培养基的配制

2020.9.01

[用途]
用于常见L型细菌的分离培养。
1.Kaqan分离平板
[配法]
牛肉浸液800m1,氯化钠50g,蛋白胨(OXoid)20g,琼脂粉(Oxoid)8g,血浆(人、马、羊)200m1。
将前四种成分称量混合加热溶解,校正pH 至7.5±0.1,分装每瓶80m1,121℃灭菌15min冷藏备用。
临用时加热溶解后,冷却至56℃加入血浆20ml摇匀倾注平板。放在密封塑料袋中,置4℃冰箱备用。
注:血浆要预先灭菌处理,并经56℃水浴灭活30min。
2.蚌埠85-7分离平板
[配法]
牛肉浸液1L,氯化钠40g,蛋白胨30g,明胶(生物试剂)30g,琼脂粉5~8g。
将上述成分混合,加热溶解,校正pH 至7.4~7.6,分装后,经121℃灭菌15min后倾注平板,置4℃冰箱备用。
[用法]
将血、脑脊液、尿等标本或增菌培养物滴种于平板约0.1m1,用L型玻棒均匀涂开,置35℃温箱内启盖片刻,除去平板表面水分。在平板的边端贴一片专用诱导纸片。覆盖后置35℃10 %二氧化碳环境下3~5 天,逐日观察。如有可疑L型菌落,用低倍镜检查。在诱导区与非诱导区同时见到L型菌落说明标本内确有L型细菌存在;若诱导区存在L型菌落,而非诱导区无,则提示标本内有L型细菌变异的趋向。
[质量控制]
⑴ 细菌诱导试验,在该平板上能诱导金黄色葡萄球菌CowengⅠ标准菌株出现L型菌落和G型菌落。
⑵ 用L型菌落作10-7稀释,取0.1ml接种,经培养获得单个菌落和纯培养。
[保存]
置4℃冰箱内,2周用完。

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