关于银环蛇毒素的分离纯化介绍

　　从粗毒液中分离纯化毒素一般采取离子交换层析柱及高效液相层析法。将粗毒素溶于0.05mol/L pH值5.8醋酸铵中，加于CM-Sephadex C-25柱中，采用两相线性梯度醋酸铵洗液洗脱：Ⅰ为从50mmol/L（pH值5.8）到500mmol/L（pH值7.0），Ⅱ为从500mmol/L到1.0mmol/L（pH值7.0），可得到12种蛋白组份。其中Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ-1、Ⅻ-2和Ⅸ分别为β1至β5，每一种组份可用Sephadex G-75或高效液相层析进一步纯化。 [42]

　　对于毒素中A链与B链的分开一般采用Chang（1993）的方法，即用二硫苏糖醇还原链间二硫键，蛋白与二硫苏糖醇的分子比率为1∶4，然后在Syn Chropak RP-P柱（4.6mm×250mm，用0.1%TFA平衡，25%-30%的乙腈线性梯度液洗脱）上进行高效液相层析分离纯化。A、B链的分离也可以选用2-巯基乙醇还原，然后用碘乙酸烷化。