为什么要进行传代培养
传代培养通常是动物细胞培养才会用到的名词,在植物组织培养过程中称为继代培养。通常植物组培的目的是快繁,所以需要继代产生大量中间繁殖体再进行再分化培养产生植株。
传代培养是指需要将培养物分割成小的部分,重新接种到另外的培养器皿(瓶)内,再进行培养的过程。对单层培养而言,80%汇合或刚汇合的细胞是较理想的传代阶段。
传代方法:
1、悬浮生长细胞传代
多采用离心法传代。1000转/分,20-30秒后去上清。沉淀细胞加新培养液后再混匀传代。亦有直接传代法,即悬浮细胞沉淀在瓶壁时,将上清培养液去除1/2-1/3,然后用吸管直接吹打形成细胞悬液再传代。
2、半悬浮生长细胞传代(Hela细胞)
此类细胞部分呈现贴壁生长现象,但贴壁不牢,可用直接吹打法使细胞从瓶壁脱落下来,进行传代。
3、贴壁生长细胞传代
采用酶消化法传代。常用的消化液有0。25%的胰蛋白酶液。
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