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液相色谱仪紫外可见吸收检测器简介

2019.12.27

液相色谱仪紫外可见吸收检测器(UVD)属于选择性检测器,是液相色谱中应用最广泛的检测器。液相色谱中约75%的检测器是UVD(其中50%是多波长,25%是PDAD)。

一、结构与原理:

液相色谱流通池内样品的浓度与吸光度的关系遵循Beer定律:

        A = ㏒(I0/I)=εbc

式中:A为吸光度,I0为入射光强度,I为透射光强度,ε为样品的摩尔吸光度,b为流通池的光程长度,c为样品浓度。

UVD常用氘灯作光源,装有一个光栅型单色器,有两个流通池,一个是参比池,另一个是测量池。

氘灯发射出紫外-可见区范围的连续波长的光,波长选择范围为190~800nm。光线照射到全息凹面光栅上,衍射的单色光照射到半透射反光镜上被分成两束,一束经测量池后照射到测量光电池上,另一束经参比池后照射到参比光电池上。若两个流通池都通过纯的均匀溶剂,则它们在紫外光下几乎无吸收,两个光电池上接收到的辐射强度相等,即无信号输出。当组分进入测量池时,吸收一定的紫外光,使两个光电池接收到的辐射强度不等,即有信号输出,输出信号大小与组分浓度成正比。

二、特点:

1、波长可选。

2、灵敏度高。

3、噪声低,线性范围宽。

4、对流动相的温度和流速变化不敏感。

5、适用于梯度洗脱,可用于制备。

6、能与多种检测器串联使用。

三、不足:

1、对紫外吸收差的化合物(如不含不饱和键的烃类等)灵敏度很低。

2、流动相的选择受到一定限制。

(1)紫外吸收大的溶剂不能做流动相。

每种溶剂都有截止波长,当小于该截止波长的紫外光通过溶剂时,溶剂的透光率降至10%以下,因此,流动相的截止波长不能大于UVD的工作波长。用截止波长以上至少5~10nm作为工作波长。

(2)缓冲盐、离子对试剂和胺改性剂也会有影响。

四、应用:

对大部分有机物有响应。


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