2 　结果

211 　最大潜伏期测定结果　35 只小鼠中,2 只原地打转,

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宁夏医学院学报

Journal of Ningxia Medical College

第28 卷　3 期

2006 年6 月

不符合实验要求被剔除。33 只小鼠中有31 只经2d (16 次)训练,能够在第16 次训练后70s 以内找到平台,超过总数

的90 % ,因此,确定最大潜伏期为70s。

212 　注射MLA 动物定位航行试验

21211 　逃逸潜伏期:训练5d 后,各组与正常对照组逃逸潜伏期比较差异无统计学意义( P > 0105) ; 注射MLA 后,

418μg/ g 组和正常对照组比较逃逸潜伏期明显延长,有统计学意义( P < 0101) ,其余各组与正常对照组比较逃逸潜伏期差异无统计学意义( P > 0105) ,见表1。

21212 　游泳速度:训练5d 后和注射MLA 后,实验各组与正常对照组速度比较无统计学意义( P > 0105) ,提示注射生理盐水和MLA 后小鼠的运动能力没有受到影响(表1) 。

表1 　各组小鼠定位航行试验寻找隐匿平台的平均潜伏期和平均速度

组别                     潜伏期(s)                            游泳速度(cm/ s)

训练5d             注射MLA 8d            训练5d               注射MLA 8d

正常对照          33.03 ±1.61           18.46 ±1.41          12.42 ±1.92            11.05 ±1.19

生理盐水          32.68 ±4.99           17.11 ±1.45          11.12 ±1.29            11.84 ±4.03

MLA 110μg/ g      31.54 ±4.99           15.11 ±1.46          13.09 ±3.21            10.56 ±1.59

MLA 418μg/ g      29.65 ±5.34           47.95 ±9.313            11.21 ±1.35             10.13 ±0.59

与对照组潜伏期比较3 P < 0101

213 　注射MLA 动物空间搜索试验　训练至第5d ,各组与正常对照组平台象限停留时间百分比比较无统计学意义( P > 0105) ;注射MLA 后,418μg/ g 组和正常对照组平台象限停留时间百分比比较有统计学意义( P < 0101) ,其余各组与正常对照组比较无统计学意义( P > 0105) ,见表2。

表2 　各组小鼠空间探索实验在目标

象限所占时间百分比

组别                      平台象限停留时间百分比( %)

训练5d                    注射MLA 8d

正常对照              45.12                         47.61

生理盐水              49.52                         45.33

MLA 110μg/ g          41.87                         45.62

MLA 418μg/ g          41.23                         29.98*

与对照组比较*P < 0101

3 　讨论

随着学习记忆脑机制研究的不断深入,以及寻找有效防治认知障碍类疾病方法的需要,客观准确地评价实验动物的学习记忆水平已经成为神经生物学和神经药理学中非常重要的研究内容。Morris 水迷宫是英国心理学家Morris 于20 世纪80 年代初设计的,主要应用在学习记忆的神经生物学机制探讨和神经药理(包括中药药理) 的研究[5 ] 。但Morris 使用这一迷宫测试方法所针对的对象是大鼠,经过查阅资料发现亦有将之应用于小鼠的,但训练方法有所不同[6 - 8 ] ,在我们的测试中,训练为5 d ,分上、下午两个时段,每段训练4 次,实验至第3 天基本稳定,提示Morris 水迷宫也适用于小鼠的记忆行为测试。测试35 只小鼠,将最大潜伏期确定为70s ,在本实验中是比较合适的,既排除了因训练时间不同,而造成小鼠记忆能力的差异,也节省了时间,确保实验的完成。但由于训练的工作量大,工作人员少,测试的样本量较少,对于更准确地确定小鼠的最大潜伏期合适范围还需要进一步的研究。Morris 水迷宫的实验数据较为复杂,其统计分析难度也较大,尤其是小鼠在定位航行中所测得的逃避潜伏期如何进行统计学分析既往存在的问题较多。在本实验中,根据正常对照组的小鼠,通过5d 的训练期和8d 测试期,逃逸潜伏期逐渐减少,但在训练2d 后基本趋于稳定,因此,取后3d 的平均逃避潜伏期作为平均训练潜伏期进行统计分析。a7nACh 受体在阿尔茨海默病(AD) 的早期就有缺失,认为是AD 的早期症状,因此人们开始试图以a7nACh 受体为靶点,研究其结构、分布和功能与AD 的关系。但由于神经元烟碱受体( nAChR) 亚型之间差别很小,数量又很多,就α7nACh 受体亚型也不仅有种属差异,而且随年龄的变化而有改变,因此,要寻找α7nACh 受体亚型特异性拮抗剂或激动剂是非常艰难的,虽然近年来在合成竞争性特异性激动剂方面取得一些进展[9 ] ,但具有高亲和性特异性高的拮抗剂还是很少的,目前仅有a -bungarotoxin[10 ]和a - conotoxinI2mI and methyllycaconitine(MLA) [11 ] 。MLA 对哺乳类动物的神经型a7nACh 受体的亲和性比其它烟碱受体都要高。本实验中腹腔注射MLA 110 、418μg/ g 后,发现MLA 对小鼠的记忆有损害,且有剂量依赖性,提示可以通过选择适当剂量的MLA ,拟建立一种模拟a7nACh 受体靶点损伤的动物模型,为进一步研究α7nACh受体在AD 等神经系统退行性疾病的作用机理和针对治疗α7nACh 受体损伤的药物开发提供依据。