使用高效液相色谱仪对食品中山梨酸、苯甲酸测定方法
高效液相色谱法(第二法)
6原理
样品加温除去二氧化碳和乙醇，调pH至近中性，过滤后进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。
7试剂
方法中所用试剂，除另有规定外，均为分析纯试剂，水为蒸馏水或同等纯度水，溶液为水溶液。
7.1甲醇：经滤膜(0.5μm)过滤。
7.2稀氨水(1＋1)：氨水加水等体积混合。
7.3乙酸铵溶液(0.02mol/L)：称取1.54g乙酸铵，加水至1000mL，溶解，经滤膜(0.45μm)过滤。
7.4碳酸氢钠溶液(20g/L)：称取2g碳酸氢钠(优级纯)，加水至100mL，振摇溶解。
7.5苯甲酸标准储备溶液：准确称取0.1000g苯甲酸，加碳酸氢钠溶液(20g/L)5mL，加热溶解，移入100mL容量瓶中，加水定容至100mL，苯甲酸含量为1mg/mL，作为储备溶液。
7.6山梨酸标准储备溶液：准确称取0.1000g山梨酸，加碳酸氢钠溶液(20g/L)5mL，加热溶解，移入100mL容量瓶中，加水定容至100mL，山梨酸含量为1mg/mL，作为储备溶液。
7.7苯甲酸、山梨酸标准混合使用溶液：取苯甲酸、山梨酸标准储备溶液各10.0mL，放入100mL容量瓶中，加水至刻度。此溶液含苯甲酸、山梨酸各0.1mg/mL。经滤膜(0.45μm)过滤(同时测定糖精钠时可加GB/T5009.28中3.4糖精钠标准储备溶液)。
8仪器
高效液相色谱仪(带紫外检测器)。
9分析步骤
9.1样品处理
9.1.1汽水：称取5.00～10.0g样品，放入小烧杯中，微温搅拌除去二氧化碳，用氨水(1＋1)调pH约7。加水定容至10～20mL，经滤膜(0.45μm)过滤。
9.1.2果汁类：称取5.00～10.0g样品，用氨水(1＋1)调pH约7，加水定容至适当体积，离心沉淀，上清液经滤膜(0.45μm)过滤。
9.1.3配制酒类：称取10.0g样品，放入小烧杯中，水浴加热除去乙醇，用氨水(1＋1)调pH约7，加水定容至适当体积，经滤膜(0.45μm)过滤。
9.2高效液相色谱参考条件
9.2.1色谱柱：YWG－C184.6mm×250mm10μm不锈钢柱。
9.2.2流动相：甲醇：乙酸铵溶液(0.02m0l/L)(5：95)。
9.2.3流速：1mL/min。
9.2.4进样量：10μL。
9.2.5检测器：紫外检测器，波长230μm，灵敏度0.2AUFS。
根据保留时间定性，外标峰面积法定量。
9.3计算
式中：X2——样品中苯甲酸或山梨酸的含量，g/kg；
m3——进样体积中苯甲酸或山梨酸的质量，mg；
V4——进样体积，mL；
V3——样品稀释液总体积，mL；
m4——样品质量，g。
结果的表述：报告算术平均值的二位有效数。
9.4允许差：相对相差≤10%。
9.5其他
同GB/T5009.28的5.6。
注：本方法可同时测定糖精钠。
