菌种保藏实验_核酸的保存

1. 以溶液形式置低温保存

DNA 溶于无菌 TE 缓冲液（10 mmol/L Tris • HCl，1 mmol/L EDTA，pH 8.0）中，其中 EDTA 的作用是整合溶液中二价金属离子，从而抑制 DNA 酶的活性（Mg²⁺ 是 DNA 酶的激活剂）。 TE 的 pH 为 8.0 是为了减少 DNA 的脱氨反应。哺乳动物细胞 DNA 的长期保存。可在 DNA 样品中加入 1 滴氯仿，避免细菌和核酸酶的污染。RNA 一般溶于无菌 0.3 mol/L 醋酸钠（pH 5.2）或无菌双蒸馏水中，也可在 RNA 溶液中加 1 滴 0.3 mol / L VRC（氧钒核糖核苷复合物），其作用是抑制 RNase 的降解。核酸分子溶于合适的溶液后可置 4℃ 、-20℃ 或 -70℃ 条件下存放。4 ℃ 条件下样品可保存 6 个月左右， -70℃ 条件下则可存放 5 年以上。

2. 以沉淀的形式置低温保存

乙醇是核酸分子有效的沉淀剂。将提纯的 DNA 或 RNA 样品加入乙醇使之沉淀，离心后去上清液，再加入乙醇，置 4℃、- 20℃ 可存放数年，而且还可以在常溫状态下邮寄。

3. 以干燥的形式保存

将核酸溶液按一定的量分装于 Eppendorf 管中置低温（盐冰，干冰、低温冰箱均可）预冻，然后在低温状态下真空干燥，置 4℃ 可存放数年以上。取用时只需加入适量的无菌双蒸馏水，待 DNA 或 RNA 溶解后便可使用。