红藻氨酸的研究与运用

　　①目的：探讨红藻氨酸（kainic acid，KA）致癫痫大鼠海马组织中低氧反应基因血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial gowth factor，VEGF）、促红细胞生成素（erythropoietin，EPO）、低氧诱导因子1α（hypoxia-inducible factor-1 alpha，HIF-1α）不同时间点表达量的差异，并分析三者间的相关性。

　　方法：腹腔注射KA建立大鼠癫痫模型.采用TaqMan探针实时定量PCR（real-time quantitative PCR）技术，检测注射KA后不同时点大鼠海马组织中低氧反应基因VEGF、EPO和HIF-1α表达量的变化。

　　结果：与对照组相比，注射KA后不同时间点各基因的表达量：VEGF表达量在12h[（8.38± 1.27）×10-3 ng/μl，P<0.05）]、24 h[（8.30±5.08）×10-3ng/μl，P<0.05）]显著升高；EPO表达量在12 h[（8.42±0.90）×10-5 ng/μl，P<0.05）]，48h[（1.50±3.25）×10-2 ng/μl，P<0.01）]均明显升高；而HIF-1α在24 h[（2.11±0.21） ×10-2ng/μl，P<0.01）]、48 h[（1.50±0.33） ×10-2 ng/μl，P<0.05）]、72 h[（1.64±0.16）×102 ng/μl，P<0.01）]均有显著的升高。EPO与HIF-1α及VEGF显著相关（r=0.573，0.471，均P<0.05），HIF-1α与VEGF相关性更高（r=0.803，P<0.01）。

　　结论：VEGF、EPO和HIF-1α参与了癫痫的发生发展，并且三者在癫痫发作过程中存在一定的相关性。 [6]

　　②目的：研究合成红藻氨酸（synthetic kainic acid，SKA）对星形胶质细胞（astrocytes，AST）细胞骨架微丝表达及缝隙连接的影响。

　　方法：取1日龄Wistar乳鼠大脑，差速贴壁法去除成纤维细胞，并利用振荡分离法去除少突胶质细胞，获得高纯度的AST细胞。将SKA和其它干涉剂与AST细胞共培养24 h后，用激光扫描共聚焦显微镜观察SKA对骨架蛋白中纤丝状肌动蛋白（F-actin）形态学及表达量的影响，并观察缝隙连接通道阻滞剂1-庚醇（1-heptanol，1-Hep）对SKA作用的影响。

　　结果：和对照组相比，KCl组和KCl+SKA组的荧光强度均明显增强（P<0.01），后者更明显（P<0.01）；镜下这2组的F-actin细丝状物较对照组明显增多、增粗、密集，KCl+SKA组更甚。1-Hep可明显降低KCl和SKA所致的F-actin表达，镜下所有1-Hep组可见细胞内部分丝状断裂，有些呈横切状。

　　结论：SKA诱发癫痫的机制可能与其诱发AST细胞中F-actin的增多有关，细胞间缝隙连接可能参与了SKA诱发癫痫的过程。