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简述位点特异性重组的最终结果

2022.11.10

  其结果是G(+)和G(-)噬菌体对不同株E.coli有不同的特异性。在G(+)方向,基因S和U表达,其产物使噬菌体可吸附在E.coliK12上,但不能吸附在E.coliC上,反之,在G(-)方向,基因S’和U’表达,噬菌体可吸附在E.coliC上,而不能吸附在E.coliK12上。各蛋白质的分子量为:S56000,U21000,S’48000,和U’26000。一个特殊的发现是它们的综合长度(S+U或S’+U’)所需的编码序列大约要4kb长,要比G节段长得多。

  这两套基因编码在DNA的两条互补链上而它们的共同启动子则位于则位于反向区的左侧。后者长度过短的解释是S和S’蛋白有一个共同的N端序列(Sc),Sc序列不由反向区编码。而两者不同的C端序列Sv和S'v的表达则决定于反向区的方向。U和U’基因则是独立编码的。

  Mu噬菌体的gin和沙门氏菌的hin的功能相似,它们在体外实验中甚至可互相替代。在E.coli中也有一类基因,称为pin。它能促使其邻接的约7800bp长的DNA节段倒置。在这个可倒置节段的两端有29bp长的反向重复。尚不了解这个反应有何功能。

  在体外亦可进行Gin或Hin介导的倒置反应,但还额外需要:

  ①一个宿主编码的未知蛋白质和

  ②底物DNA必须具有超螺旋。

  另外,底物DNA上除重组位点外还要一段约60bp的DNA序列,这个序列可位于底物分子上任何部位(除了十分靠近重组位点外)。此序列位置的任意性似乎与转录作用中的增强子类似,故有人称之谓重组增强子。

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