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补充ELISA试剂盒要点

2019.11.28

关键一:

血清标本可按惯例办法采集,应留心防止溶血,红细胞溶解时会开释出具有过氧化物酶活 性的物质,以HRP为符号的ELISA 测定中,溶血标本或许会添加非特异性显色。ELISA的操作因 固相载体的构成不同而有所差异,国内医学检修一般均用板式点。

关键二:标本的采纳和保存

可用作ELISA测定的标本非常广泛,体液、分泌物和排泄物等均可作标本以测定其间某种抗 体或抗原成份。重复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作屡次检测,宜少数分装冰存。一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超过一周测定的需低温冰存 。如在冰箱中保存过久,其间的可发作聚合,在间接法ELISA 中可使本底加深。保存血清自采 集时就应留心无菌操作,也可参加适当防腐剂。除特别情况外,在医学检修中均以血清作为检 测标本。本文将叙说板式ELISA各个操作过程的留心关键,珠式、管式及磁性球ELISA,试剂盒均与特别仪器配合使用,两者均有详细的使用说明,严格遵照划定操作,必能得出正确的成果。

关键三:

好的试剂,杰出的仪器和准确的操作是确保ELISA试剂盒成果正确牢靠的必要条件。 血清标本宜在新鲜时检测。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均同便是血清。 如有细菌污染,菌体中或许含有内源性HRP ,也会发生假阳性反应。有些标本可直接进行测定 ,有些则需经预处理。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清天然凝结、血块缩短后即可取得。大部分ELISA试剂盒均以血清为标本。在ELISA中血浆和血清可相等使用。冻住血清融解后,蛋白质部分浓缩,散布不均,应充沛混匀宜轻缓,防止气泡,可上下倒置混和,不要在混匀器上激烈振动。混浊或有沉积的血清标本应先离心或过滤,弄清后再检测。

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