分子荧光光度法测定二氯荧光素
分子荧光光度法测定二氯荧光素
实验实验中修改部分
一、实验目的：1、（书）
2、掌握荧光分光光度计的结构及基本使用方法
3、熟悉荧光分光光度计的应用
二、方法原理：（书）
三、仪器和试剂：
仪器：Cary/Eclipse荧光分光光度计。该仪器使用氙弧灯作为激发光源。在190~900nm的连续光谱区内进行工作。具备先进的结构性能和高效的工作效能。仪器包括激发单色器和发射单色器、氙光源；固定宽度范围的可调狭缝、可调光栅；以及两个光电备增管作为检测器。一次实验可设置测试多种样品，并对同一种样品作多次测试，实验过程均通过联机电脑的工作站进行数字化控制，精度高、重复性好！在环境条件允许的情况下，该仪器还可用于生物—化学发光的检测、磷光的检测。
试剂：（书）
四、实验步骤：
1、 配制标准溶液（按书中要求配制）
2、 接通电源，打开联机电脑，开启仪器开关。
3、 待仪器稳定后，进行参数设置。
（1） 选择荧光的检测模式
（2） 设置激发波长 500nm 发射波长520nm
（3） 设置激发狭缝宽5nm 发射狭缝宽 5nm
（4） 设置激发光栅状态 open
（5） 设置待测溶液的单位
（6） 设置待测标准样品个数 5
（7） 设置重复检测样品次数1
（8） 设置最小R2 0.95
（9） 设置待测样的个数及其重复检测次数1
（10） 设置报告模式
（11） 设置自动存贮模式为自动存贮off
4、 测定标准溶液和待测样溶液的荧光强度
5、 测定过程应将挡板关闭
五、结果处理
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