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厌氧菌的培养方法

2020.5.12

厌氧菌在有氧的情况下不能生长。要培养厌氧菌,必须创造一个无氧的环境。通常用培养基中加入还原剂,或用物理、化学方法去除环境中的游离氧,以降低氧化还原电势。如疱肉培养基、硫基乙酸钠培养基,牛心脑浸液培养基等。常用的厌氧培养方法有许多,可根据实际情况选用。

1.厌氧缸法。接种好标本的平板或液体培养基试管,可放入厌氧缸内培养,厌氧缸是普通的干燥缸,用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境,从而将厌氧菌培养出来。

2.厌氧袋(Bio-bag)即在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌。塑料袋透明而不透气,内装气体发生管(有硼氢化钠的碳酸氢钠固体以及5%柠檬酸安瓿)、美兰指示剂管、钯催化剂管、干燥剂。放入已接种好的平板后,尽量挤出袋内空气,然后密封袋口。先折断气体发生管,后折断美兰指示剂管,命名袋内在半小时内造成无气环境。如不突变表示袋内已达厌氧状态,可以孵育。

3.厌氧手套箱(Anaerobie glove box)是迄今为止国际上公认的培养厌氧菌最佳仪器之一。它是一个密闭的大型金属箱,箱的前面有一个有机玻璃做的透明面板,板上装有两个手套,可通过手套在箱内进行操作,故名。箱侧有一交换室,具有内外二门,内门通箱内先关着。欲放物入箱,先打开外门,放入交换室,关上外门进行抽气和换气(H2,CO2,N2)达到厌氧状态,然后手伸入手套把交换室内门打开,将物品移入箱内,关上内门。箱内保持厌氧状态,也是利用充气中的氢在钯的催化下和箱中钱残余氧化合成水的原理。该箱可调节温度,本身是孵箱或孵箱即附在其内,还可放入解剖显微镜便于观察厌氧菌菌落,这种厌氧箱适于作厌氧细菌的大量培养研究,大量培养基可放入作预还原和厌氧性无菌试验。金属硬壁型厌氧箱的抽气、充气、厌氧环境和温度等均系自动调节。

4.厌氧盒:原理同厌氧袋,有成品销售。

5.生物耗氧法:在一密闭的容器内放以生物(多是植物),消耗氧气,同时产生二氧化碳,供细菌生长用。

6.焦性末食子酸法:在一洁净的玻片上铺上纱布或滤纸,均匀撒上焦性末食子酸,然后再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液,迅速将已接种细菌的平板倒扣在上面,用融化的白蜡封边,造成一个封闭空间。焦性末食子酸与碱反应后耗氧。该法用于厌氧不严格的厌氧菌的培养,简单。如有梭状芽孢杆菌。

7.疱肉培养基:本身就是一个不需特殊设备的厌氧培养法。疱肉和肉汤装入大试管,液面封凡士林,造成无氧环境。
上海书俊仪器设备有限公司为您提供厌氧培养解决方案,产品为美国进口Chemglass品牌的厌氧培养系列产品:

1螺纹厌氧培养管CLS-4208系列

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16 x 125毫米螺纹管厌氧培养条件。 法兰式闭锁装置,材质为丁基橡胶。 完整的套装由一个一次性的玻璃管,丁塞和9毫米的开口螺帽组成。包装规格为PACK OF100。

2铝封厌氧培养管CLS-4209系列

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螺纹厌氧管的改进版本。重新设计密封结构,最大化管口和胶塞之间的密封性,提升气密密封稳定性。特殊配方的蓝色氯化丁基橡胶瓶塞拥有更大的密封性能,并且支持注射器的重复穿刺。新设计的铝密封避免了螺纹盖可能没有封闭紧固的风险。一次性玻璃管规格为18 x 150毫米,是由I型、B类硼硅玻璃制成。完整套装包括一次性玻璃管,蓝色氯化丁基橡胶瓶塞和铝封。包装规格为PACK OF100。

3厌氧培养瓶

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维持厌氧条件下,厌氧瓶设计用于研究涉及产甲烷细菌、细胞培养、药物发现、研究和开发。 这个瓶子是由Duran® Schott borosilicate glass制成。 瓶子是可以高温灭菌的。每个瓶子有一个刻度,表示近似的体积,并且有一个书写区域用于识别。 完整套装包括一个瓶子,橡皮塞和铝密封。注:可以提供塑料涂层瓶。


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