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小鼠还原型谷胱甘肽(GSH)elisa试剂盒使用说明书

2021.3.01

实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠还原型谷胱甘肽(GSH)水平。用纯化的小鼠还原型谷胱甘肽(GSH)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入还原型谷胱甘肽(GSH),再与HRP标记的还原型谷胱甘肽(GSH)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的还原型谷胱甘肽(GSH)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠还原型谷胱甘肽(GSH)浓度。 

【规格参数】

指标名称:小鼠还原型谷胱甘肽(GSH)elisa试剂盒      

规格:48T 96T

品牌:臻科生物

检测波长:450nm

所需样本体积:保险量50ul

适用范围:仅供科研课题研究,不得用于临床诊断。

检测样本种类:血清,血浆,尿液,组织匀浆,细胞上清液,脑脊液,灌洗液,粪便等样本.

臻科供应属种有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、人子、猪犬、牛羊、鸡鸭、植物、鱼、昆虫ELISA试剂盒等

独特优势】

1、优势明显  我司产品具有灵敏度高、特异性强、重复性好等特点,品种齐全,操作简便,最大限度的节省了实验经费。

2、品质保障  产品保证质量,出库质检把控严格,保障提供给客户的100%是优质产品,运输全程跟踪,公司承诺有任何质量问题包退换,诚信经营,合作共赢。我们提供实验室试剂、耗材一站式供应服务,超低价,高品质,进口品牌全线代理,优势的渠道,我们只做行货,不用担心质量问题。

3、专业定制  公司推出专业定制试剂盒服务,全程有专业的技术老师对接客户,直到定制成功为止。

4、免费代测 公司承诺订购ELISA试剂盒,享全程技术指导和免费代测服务,全程有专业技术老师【样本处理及要求】

1. 血清:室温血液自然凝固10-20 分钟,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2. 血浆:选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20 分钟后,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3. 尿液:用无菌管收集,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.

7. 不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

【操作步骤】

1.标准品的加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL

2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.加酶:每孔加入酶标试剂100μl,空白孔除外。

4.温育:用封板膜封板后置37℃温育60分钟。

5.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。

6.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

7.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

8.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

9.测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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