酶标仪基本知识及其检测原理
酶标仪基本知识及其检测原理，文章简要介绍了酶标仪的原理和及应用。
光是电磁波，波长100nm-400nm称为紫外光，400nm-780nm之间的光可被人眼观察到
，大子780nm称为红外光。人们只所以能够看到色彩，是因为光照射到物体上被物
体上反射回来。绿色植物之所以是绿色，是因为植物吸收了光中的红色光谱。酶标
仪测定的原理是在特定波长下，检测被测物的吸光值。
酶标仪检测单位：
酶标仪光通过被检测物，前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量，特定波长下
，同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。
酶标仪检测单位用OD值表，OD是opticaldelnsity（光密度）的缩写，表示被检
测物吸收掉的光密度，OD=10g（1/trans），其中trans为检测物的透光值。根据Bo
uger-amberT-beer法则，OD值与光强度下述系：
E=OD=logⅠ0/Ⅰ其中E表被吸收的光密度，Ⅰ0为在检测物之前的光强度，Ⅰ为从
被检测物出来的光强度。
OD值由下述公式计算：
E=OD=C×D×E
其中：C为检测物的浓度；D为检测物的厚度；E为摩尔子。
在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长，在此波长下，此物质能够吸收zui
多的光能量。如果选择其它的波长段，就会造检测结果的不准确。此，在测定
检测物时，我们选择特定的波长进行检测，称为测量波长。
但是每一种物质对光能量还存在一定的非特异性吸收，为了消除这种非特异性吸收
，我们再选取一个参照波长，以消除这个不准确性。在参照波长下，检测物光的吸
收zui小。检测波长和参照波长的吸光值之差可以消除非特异性吸收。
酶标仪检测值计算
酶标仪中的检测器接收透过被检测物的光能量，转换成二进位数字信号，zui大为40
95.酶标仪定义没有光源下的透光值为0%，没有检测物的透光值为100%。则实际检
测中，检测物的透光值均在0%一100%之间。
酶标仪透光值的计算如下：
T=（Meas-Min）/（Max-Min）
其中T为透光值，Meas为检测的二进位数值，Min为在0%的情下检测的二进位数值
，Max为在100%的情况下检测的二进位数值，举例如下：
酶标仪的中心定位
酶标仪会自动对酶标仪酶标孔进行中心定位，中心定位是要消除酶标仪酶标孔底的
凸凹引起的厚薄不均带来检测的不准确。在对每一个酶标仪进行检测时，仪器其实
要进行35个点的测量，选取zui中间的5个点的均值为本孔的OD值。
酶标仪光源的参照通道
参照通道是用来校准由于电压不稳或灯泡磨损带来的影响。
酶标仪的用途和其它提示
酶标仪用于ELISA试剂的测定，广泛用于各种实验室，包括临床实验室。
酶标仪质量控制
酶标仪质量控制是试剂检测的重要因素。请按照试剂说明书的要求进行质量控制。
酶标仪空白校正
有一些试剂盒的说阴书将空白孔设置为空气，其它大多数空白孔的设置是用试剂来
设置的，请按照试剂盒的说明书要求进行。
酶标仪检测结果的解释
由于有相当多的因素会影响检测的结果，如不同的酶标仪酶标板，检测试剂的体积
，都会造成OD值的不，因此，只有使用同一酶标仪酶标板反应的试剂检测结果才能
比较和分析。对结果的临床解释请依照试剂盒的说明书进行。
