分子荧光维生素B2含量的测定
维生素B2含量的测定
一、实验目的：
学习分子荧光产生的原理；利用荧光分光光度计绘制荧光激发与发射光谱图；学会判断谱图中各种峰的类型的方法。
二、实验原理：
分子吸收短波长（高能量）的光后，能量释放以光的形式出现，而发射较激发光波长更长的荧光。
三、实验内容：
1.维生素B2荧光激发光谱与发射光谱的绘制；
打开软件并打开Edit窗口，根据实验目的设置测定参数。
例如：绘制发射光谱，设定激发波长为377nm（或者454nm），发射波长范围400～700nm。 绘制激发光谱可设定发射波长为527nm，激发波长范围为200～500nm。
根据图形，确定激发光谱和发射光谱荧光峰的位置。
2.维生素B2系列标准溶液的配制；
分别取0.1000g/L标准溶液0.2 、0.4 、0.6 、0.8 、1.0ml定量转移至25ml容量瓶中，用去离子水稀释至25ml。
3.在选定激发波长（l1）下测量系列标准溶液的荧光发射光谱，测定在选定波长（l2）下的荧光强度并绘制标准工作曲线；
4.维生素B2片的处理：取维生素B2片（约0.065g）一片，用玻璃棒捣碎后定量转移至250ml容量瓶中，然后取5.00ml溶液稀释至25.00ml，在选定激发波长（l1）下测量待测溶液的荧光发射光谱，测定在选定波长下（l2）的荧光强度并计算维生素B2的浓度（g/L）；
5.根据以上数据，求出维生素B2的含量（以百分比浓度表示x％）。
四、注意事项：
1.绘制标准工作曲线与待测溶液所选定的波长l1/l2应一致；
2.能正确识别荧光光谱中的干扰峰（拉曼光等）
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