药物活性测试技术—AlphaScreen
近年来在生命科学领域中兴起的新技术——Alpha，是一种基于增强的化学发光的均相免疫技术，已广泛用于各项生物实验的研究，包括应用于药物活性测试。Alpha技术包括AlphaScreen和AlphaLISA技术， 两种方法都使用同一种供体微珠，但使用不同的受体微珠。
AlphaScreen技术是基于生物分子物质的相互作用的原理发展起来的，如抗原抗体反应、蛋白DNA相互作用、蛋白相互作用等，通过分子之间的相互作用形成供体微珠、受体微珠和相互作用分子的复合物。使用680nm的激光激发供体微珠导致单线态氧分子释放，引发能量转移级联反应，受体微珠发射520~620nm的光波， 具有较强的抗淬灭能力。若生物分子不存在特异的相互作用，单体氧将无法扩散到受体微珠，则不会有信号的产生[1]。
Alpha技术既可以用于检测细胞内的各个生物标志物，也可以进行各类分子相互作用研究，近年来Alpha技术也可以应用于药物活性检测。药物活性测试在药物质量控制中较为重要，目前对药物的活性分析方法主要是体外检测。上海美迪西的生物部在体外生物学领域有丰富广泛的经验，通过酶水平测定、细胞水平测定、细胞生物学、生物化学、体外同位素测定、稳定细胞株建立、基因敲除、RNAi和MicroRNA技术等，提供一套完整的生物学服务。
AlphaScreen技术应用于药物研发领域，其主要优势在于待测物质的范围宽泛，包括从小分子到大型复合物；均相体系、快速、稳定，灵敏度更高。而且AlphaScreen检测也不需要荧光标签的引入，避免了空间位阻影响生物分子的相互结合。AlphaScreen技术也可以用于检测诸如细胞裂解物、血清、血浆、体液等生物学粗提取，而不会影响测读效果。
然而AlphaScreen技术主要的限制在于反应体系对于强光或是长时间的室内光敏感；某些化合物对于单体氧分子的捕获会降低光信号；供体珠光漂白效应使得信号检测以单次为佳。与ECL、FMAT技术相似，AlphaScreen也需要高能激光器；同其他技术相比，AlphaScreen对于检测仪器平台有要求。
AlphaLISA技术是在AlphaScreen技术的基础上发展而来，其发射峰在615nm处，避开了血清以及组织中其他成分的发射峰。与AlphaScreen相比，AlphaLISA的发射光会受到500-600nm吸收光干扰的可能性更低，无论这种干扰是来自人工合成的化合物或是天然产物(比如血红蛋白)，从而使检测的背景降至最低。高通量的生物标志物筛选分析对于自动化检测仪器平台的要求较迫切，而目前常见的生物标志物检测技术为ELISA。AlphaLISA技术也可以用于生物标志物检测，检测原理类似于双抗体夹心法，该技术能够很好地满足生物标志物的高通量筛选需求。
AlphaLISA技术还可以用于合成化合物的活性测试。如有研究者设计、合成一系列黄酮乙酸类衍生物肿瘤血管破坏剂，并测定其体外抗肿瘤活性[2]。研究者以邻羟基苯乙酮为起始原料，通过氯甲基化、氰基取代、水解以及缩合等反应得到相应的目标化合物；以5，6-二甲基呫吨酮-4-乙酸(DMXAA)为阳性对照药，通过3种模型对目标化合物的抗肿瘤活性进行评价，包括采用Al-phaLISA法检测目标化合物对RAW 264.7细胞的促TNF-α分泌作用、采用MTS法测定化合物的细胞毒作用，以及采用鸡胚绒毛尿囊膜模型测定化合物对鸡胚血管生成的影响。研究结果发现合成的18个化合物均未见文献报道，其结果经1 H-NMR、MS谱确证；活性评价结果表明有3个目标化合物在抗肿瘤测试中表现出较好的体外抗肿瘤活性。
[1] AlphaLISA技术的发展及应用[J].
[2] 黄酮乙酸类衍生物肿瘤血管破坏剂的设计、合成及其抗肿瘤活性的初步评价[J].
