基因治疗或可成为亨廷顿舞蹈症治疗的关键, mHTT蛋白成为HD最佳生物标志物

死亡之舞

亨廷顿舞蹈症（Huntington’ s disease, HD），又名慢性进行性舞蹈症，是一种缓慢起病的遗传性神经退化疾病。

亨廷顿舞蹈症表现为短暂不能控制的装鬼脸、点头、手指跳动。随病情加重，不随意运动恶化，出现舞蹈样不自主运动、吞咽困难等症状。亨廷顿舞蹈症通常在发病 15～20 年后死亡，对亨廷顿舞蹈病的治疗目前仅限于针对症状的治疗，没有方法可以预防发病或减缓进展，因此国内外医学界称之为“死亡之舞”。

图片来源：https://trypanophobia.wordpress.com/2012/10/30/darker-dancing/  

停止死亡之舞！

亨廷顿舞蹈症由常染色体显性突变引起，在亨廷顿基因（HTT）的第一个外显子中存在CAG三核苷酸的异常重复扩增，大脑中不断聚集突变蛋白（mHTT），最终导致神经功能失调和退化。

通过基因治疗，靶向抑制突变CAG重复序列，抑制mHTT表达，或可成为亨廷顿舞蹈症治疗的关键。

“纳米级手术刀”扭转局面

2019年6月， Nature Medicine 发文报道，通过对转基因tgHD小鼠的研究发现，重组AAV将ZFP-TFs递送给原代神经元，可实现突变mHTT mRNA和mHTT蛋白降低98%以上，但对正常HTT表达没有影响。通过脑脊液中mHTT蛋白检测发现，mHTT蛋白呈现剂量依赖性减少，一次注射就可以使mHTT在相当长一段时间内稳定。

2020年2月，Nature Communications 在线发文，通过重组AAV将AAV-GFAP-Cre、AAV-DIO-NeuroD1和AAV-DIO-Dlx2混合注射在纹状体中，可将纹状体星形胶质细胞成功转化为神经元。

近期，uniQure公司宣布其基于AAV5的候选基因疗法AMT-130用于治疗亨廷顿病已获得FDA研究性新药（IND）批准，允许开始其I/II期临床研究。

不治之症或将在基因治疗手中，扭转局面。

mHTT蛋白成为亨廷顿舞蹈症研究的最佳生物标志物之一

对亨廷顿舞蹈症患者脑脊液中疾病相关蛋白进行定量分析，有助于监测疾病进展和评估治疗干预的效果。伴随着疾病的进展，患者脑脊液中的mHTT浓度增加；治疗后mHTT蛋白浓度呈剂量性下降。mHTT蛋白成为亨廷顿舞蹈症研究的最佳生物标志物之一。

病程最早期mHTT蛋白在脑脊液中浓度非常低，通常低至fg/ml级别，常规Elisa等蛋白检测方法无法检出这些蛋白。治疗晚期检测中，同样也会出现这一问题。因此，在病程监控和治疗效果评价中，通过超高灵敏度的蛋白检测方法实现fg/ml低丰度表达蛋白的定量显得尤为重要。

图：SMC™超敏技术对不同年龄tgHD小型猪脑脊液中mHTT蛋白进行检测，年龄与mHTT水平呈正相关（Molecular Therapy，2018）

默克SMC™超敏检测实现mHTT蛋白飞克级定量

默克SMC™ 单分子免疫检测平台，可实现10 μL脑脊液中mHTT蛋白fg/ml准确定量。针对mHTT-Q45(1-573)定制开发的SMC™试剂盒最低检测下限LOD可达0.043 pg/mL （数据来自默克R&D实验室），满足样本中mHTT基线的全部检出。

图2：SMC™独特的检测洗脱步骤和ZL的激光单分子计数技术，有效降低背景信号值，增强检测信号，实现飞克级蛋白定量