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阻断ELISA法的操作程序

2023.2.14

本法主要用于检测型特异性抗体。该方法现已成为猪传染性胃肠炎(TGE)、猪伪狂犬病(PR)及猪胸膜肺炎(AP)的主要检测方法。下面以AP2型抗体的阻断ELISA检测法为例介绍其操作程序:

① 100μl AP2型工作量抗原包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干

② 用200μl阻断缓冲液进行封闭 → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干

③ 加工作量1:4稀释被检猪血清100μl → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干

④ 加100μl工作量兔抗AP2型血清 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干

⑤ 加100μl工作量猪抗兔IgG-HRP → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干

⑥ 加100μl OPD底物液 → 37℃ 20分钟,加终止液

⑦ 用ELISA检测仪测定OD值。

本试验同时设标准阴、阳性血清对照、兔抗AP2型阳性对照、空白对照。


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