基 本 方 案 1 采 用 PS-SCL 筛选抗体抑制剂

材 料

肽或蛋白质抗原

目的抗原的单克隆抗体（M A b )

1 % (m/V) BS A / P B S (见附录 1PBS)

六 肽 的 PS-SCL ( 表 13. 3.1): 5 m g / m l 的 1 2 0 肽 混 合 物（若 需 详 细 资 料 ，联系C. Pinilla9 cpinilla@tpims.org)

辣 根 过 氧 化 物 酶（ H R P ) 偶 联 M A b 的 同 种 型 抗 体 的 特 异 性 的 抗 鼠 抗 体（Calbioc h e m ; 按生产商提供的说明书使用）

显影液

4mol/L 硫酸

结合能力较强的聚苯乙烯 9 6 孔 微 量 滴 定 板（如 A / 2 板 ， Costar; Immunolon 4 板 ，Dynatech)

保湿盒：用湿纸巾密封的 Tupperware 盒

带 有 4 9 2 n m 滤光片的 9 6 孔微量滴定板读板仪（酶联仪）

1 . 通过抗原-抗体结合的直接和竞争性 E L I S A (见辅助方案）选择最佳的抗原和单抗浓度用于筛选检测。

2 . 加 入 50^1/孔的优化浓度的肽或蛋白质抗原包被 9 6 孔板。每种肽复合物做 2 个复孔。若 每 板 有 8 0 个 样 孔（图 13. 3 . 1 ) 则 准 备 三 个 板 检 测 P S - S C L 的 120 肽复合物。在37°C 下的保湿盒中孵育 2 h 或在室温条件下放置过夜 （18 h )。

3 .翻转滴定板并弃去液体，用水清洗滴定板 1 0 次 。将滴定板在纸巾上拍击以除去残留