| 实验步骤 |
一 材料与设备
1）大鼠肝脏 ：大鼠用颈部击打法处死 ，取出肝脏 ，立即置于液氮屮 ，备用
2）苯酚 -甲酚混合液 ：将 500 g 苯酚（须重结晶）及 70 mim-甲酚溶于 50 m l 蒸馏水中 ，并加入 0.5 g8-羟基喹啉
3）萘 1.5-二磺酸溶液：0 .5 g 萘 1.5 -二磺酸 溶 于 100 ml 蒸馏中
4）洗涤液 A:20 g 苯甲酸 钠 ，10 ml m- 甲酚 及 3 g 氯化钠溶于 100 ml 蒸馏水中
5）洗涤液 B: 75 ml 无水乙醇及 l g 氦化钠溶溶于 25 ml 蒸馏水中
6)75.% 乙醇溶液
7)三异丙基萘磺酸钠
8)无水乙醇
二 操作方法
1）称取鼠肝 15g 左右，加于10 倍体积的苯酚-甲酚混合溶液以及 10 倍体积的萘 5-二磺酸溶液.在下用匀浆器匀浆
2)将匀浆液取出置于烧杯中.2℃ 搅拌 20min,于50℃，6000g 离心 15min，弃沉淀，
3)上淸液加入三异丙萘磺酸钠，至最终浓度为5%,再加入 1/2 体积的苯酚-甲酚溶液，于 20℃搅拌 20min,然后以 8000g, 5℃ 离心 10 min.弃沉淀
4)在每 100ml 离心上清液屮依次加入 3g 氯化钠，2g 苯甲酸钠及 10mim-甲酌。搅拌溶解均匀后，用 8000g，5℃ 离心10min。弃上清液。
5)将沉淀物按下列顺序离心洗涤：用冷的洗涤液A 洗二次,洗涤液 B、75% 乙醇溶液各洗一次，再用无水乙醇冼二次，每次均用 25ml 最后得纯的鼠肝 rRNA. 取出 rRNA，置于装有 CaCl2 的真空干燥器中干燥。
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