大肠杆菌DNA聚合酶的介绍
大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ（DNApolymeraseⅠ，DNApolⅠ）这是1956年由ArthurKornberg首先发现的DNA聚合酶，又称Kornber酶。此酶研究得清楚而且代表了其他DNA聚合酶的基本特点。
⑴理化性质：纯化的DNApolⅠ由一条 多肽链组成，约含1000个 氨基酸残基，MW为109KD。分子含有一个二硫键和一个-SH基。通过二个酶分子上的-SH基与Hg2+结合产生二聚体，仍有活性。每个酶分子中含有一个Zn2+，在DNA聚合反应起着很重要的作用。每个大肠杆菌细胞中含有约400个分子，每个分子每分钟在37℃下能催化667个 核苷酸掺入正在生长的DNA链。经过 枯草杆菌蛋白酶处理后，酶分子分裂成两个片段，大片段分子量为76KD，通常称为 Klenow片段，小片段的分子量为34KD。此酶的模板专一性和底物专一性均较差，它可以用人工合成的RNA作为模板，也可以用核苷酸为底物。在无模板和 引物时还可以 从头合成同聚物或异聚物。
DNAPolⅠ在 空间结构上近似球体，直径约65A。在酶的纵轴上有一个约20A的深沟（cleft），带有正电荷，这是该 酶的活性中心位置，在此位置上至少有6个结合位点：
[1]模板DNA结合位点；
[2]DNA 生长链或引物结合位点；
[3]引物末端结合位点，用以专一引物或DNA生长链的3'-OH；
[4] 脱氧核苷三磷酸结合位点；
[5]5'→3'外切酶 活性位点，用以结合生长链前方的5'-端脱氧核苷酸并切除之；
[6]3'→5'外切酶活性位点，用以结合和切除生长链上未配对的3'-端核苷酸。
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