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PCR实验室空调通风系统设计及压力控制

2022.3.11

  PCR实验室并没有严格的净化要求,但是为避免各个实验区域间交叉污染的可能性,宜采用全送全排的 气流组织形式。同时,要严格控制送、排风的比例以保证各实验区的压力要求。

  1、试剂贮存和准备区

  该实验区主要进行的操作为贮存试剂的制备、试剂的分装和 主反应 混合液的制备。试剂和用于标本制作的材料应直接运送至该区,不得经过其他区域。试剂原材料必须贮存在本区内,并在本区内制备成所需的贮存试剂。对与气流压力的控制,本区并没有严格的要求。

  2、标本制备区

  该区域主要进行的操作为临床标本的保存、 核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA时cDNA的合成。本区的 压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的 气溶胶污染。另外,由于在加样操作中可能会发生 气溶胶所致的污染,所以应避免在本区内不必要的走动。

  3、扩增反应混合物配制和扩增区

  该区域主要进行的操作为DNA或cDNA扩增。此外,已制备的DNA模板和合成的cDNA(来自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。在 巢式PCR测定中,通常在第一轮扩增后必须打开反应管,因此巢式扩增有较高的污染危险性,第二次加样必须在本区内进行。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压,以避免气溶胶从本区漏出。为避免气溶胶所致的污染,应尽量减少在本区内的不必要的走动。个别操作如加样等应在 超净台内进行。

  4、扩增产物分析区

  该区域主要进行的操作为扩增片段的测定。如使用全自动封闭 分析仪器检测,此区域可不设。本区是最主要的扩增产物污染来源,因此对本区的压力梯度的要求为:相对于邻近区域为负压,以避免扩增产物从本区扩散至其它区域。

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