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简述层析法的原理

2023.3.17

  层析法利用混合物中各组分的物理化学性质间的差异(溶解度、分子极性、分子大小、分子形状、吸附能力、分子亲合力等),使各组分在支持物上集中分布在不同区域,借此将各组分分离。

  层析法进行时有两个相,一个相称为固定相,另一相称为流动相。由于各组分所受固定相的阻力和流动相的推力影响不同,各组分移动速度也各异,从而使各组分得到分离。

  层析技术与待分离混合物中各组分的理化性质(分子自然形状、大小、获电状态、溶解度与选择性吸附剂或载体物的吸附能力,分配系数、酸碱环境、温度、极性以及分子的亲和能力等)有着直接关系。除此,任何层析技术,均具有两相条件,造成流动相对固定相作单向相对运动。这种流动相推动样品中各组分通过固定相向前迁移,其运动速率与两相物质和被分离物质状态有关。由于被分离物各组分中的理化性质不同,对不同的两组或两组以上组分,具有不同的作用力,通过吸附一解吸,或离子交换、分子筛效应、静电引力,免疫特异性吸附等,造成各组间生物分子分离、迁移距离不等,最终达到被测物的分离、纯化的目的。这一技术的应用,不但能分离有机化合物,还能分离无机物,更主要的是适合于分离分析生物高分子物质,其分离范围广,适用性强。化学性稳定、灵敏度高,既可纯化又可制备,条件简便。

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