酶切、回收、连接 常识（3）
9． 限制酶反应结果若显示没有切割，可能原因是（A，B，C，D，E）
A． 限制酶无活性 B 存在抑制剂如SDS，EDTA C DNA不纯
D． 缓冲液组成不合适 E DNA甲基化
10．下列关于限制酶的叙述正确的是（B，C，D）
A． 在限制与修饰系统中，修饰主要是甲基化作用，一旦位点被甲基化了，其他限制酶就不能切割了。
B． 限制酶在DNA中的识别/切割位点的二、三级结构影响酶切效率。
C． 如果限制酶的识别位点位于DNA分子末端，那么接近末端的程度也影响切割。
D． 已知某限制酶在一环状DNA上有3个切点，因此该酶切割这一环状DNA，可得到3个片段。
E． 能产生防御病毒侵染的限制酶的细菌，其自身的基因组中没有该酶识别的序列。
11．酶在储存过程中迅速失活，可能原因是（A，B，C，E）
A． 储存温度不合适 B 稀释后储存 C 储存缓冲液不合适
D． 分装后储存 E 储存缓冲液中蛋白浓度低
12．限制酶切反应结果显示为部分切割，可能原因是（A，B，C，D，E）
A． 限制酶失活 B 有抑制剂如SDS，EDTA等存在 C 反应条件不合适
D DNA不纯 E DNA结构（线形或超螺旋）的影响
13．如果用限制酶切割DNA后得到的片段比预期的多，可能原因是（B，C，E）
A． 限制酶失活 B 限制酶的星号活性 C 有其他限制酶污染
D 有抑制剂存在 E 测试DNA中有其他DNA污染
14．限制酶切割后的产物连接反应效果差，可能原因是（A，B，C，E）
A．限制酶去除不完全 B 平端连接 C 核酸外切酶污染
D．连接反应温度低于16℃
E．从限制酶消化中带来太高浓度的磷酸盐或其他盐类
15．下列限制酶属同裂酶的是（A，B，D，E）
A．BamHI G↓GATCC Sau3AI ↓GATC
CCTAG↑G CTAG↑
B． Sal I G↓TCGAC Xho I C↓TCGAG
CAGCT↓G GAGCT↓C
C． BamH I G↓GATCC EcoR I G↓AATTC
CCTAG↓G CTTAA↓G
D. Hpa II G↓CGC Msp I C↓CGG
CGC↓G GGC↓C
E. Xba I T↓CTAGA Nhe I G↓CTAGC
AGATC↓T CGATC↓G
