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临床生化试剂检测中的各种交叉污染

2021.5.14

第一类:前一测试项目试剂中含有紧跟其后测试项目所要测定的底物。

此时残留的污染物被带入下一测试中,与该测试的试剂反应,可能会导致结果异常。引起这类交叉污染产生的物质明确,并且可以定量分析。主要项目有:

  1. ALT(IFCC法),AST(IFCC法)含高活性的LDH,会影响其后的LDH结果。 

2. CK-NAC、CK-MB-NAC酶偶联测定试剂含高浓度Glucose,会干扰其后的血糖测定,尤其对HK法干扰严重。

3. Glu(GOD法)、UA(尿酸酶法)、a-HBDH、 TG、 Ca(偶氮胂III法)、 TC(CHOD- PAP)等均采用磷酸盐缓冲液,会干扰位于其后无机盐(P)的结果。

4. ALP(IFCC-AMP法),CK-NAC,CK-MB-NAC,TG(GPO法)试剂均含高浓度Mg2+会影响紧随其后的Mg2+的结果。

5. TC、HDL-C、HDL-C、LDL-C采用胆固醇氧化酶法的试剂含胆酸钠,会干扰紧跟其后的TBA结果,致假性偏高。

6. 以4NP-G4为底物的AMY试剂含Ca2+浓度高会影响其后测Ca2+的准确性。

7. TG,TC试剂中有LIP,会导致LIP的测试结果不真实。

该种类型的交叉污染单试剂终点法的受污染项目测试结果的抬高或降低反映的是搅拌杆的携带污染。因为试剂针携带进来的上一个测试的干扰物会和下一个试剂发生反应,由于携带量小,一般在试剂空白段(2min)即反应平衡。而双试剂项目的测试结果反映的是试剂针和搅拌杆的综合污染。

第二类:前一测试项目试剂中的某种(些)成份干扰紧随其后测试项目所要测定的底物。

引起这类交叉污染产生的物质明确,但和第一类不同的是,前一测试残留并带入下一测试的污染物并非待测物本身,而是能与待测物进行其他的反应或显色物质波段重叠或引起测试条件的变化如PH值改变等,从而带来对测试过程的干扰,这种干扰作用不易进行定量分析。主要项目有:

  1. TC、HDL-C、HDL-C、LDL-C最终反应都是过氧化氢和4-氨基安替比林在过氧化酶的作用下产生醌亚胺显色(505nm),因此这些项目间会相互干扰2. TP的检测原理是蛋白质与铜离子生成紫蓝色复合物,该显色物质在546nm有吸收峰,在波段500nm~600nm都有较大吸收;因此TP试剂可能影响500nm -600nm波段的终点法显色测定(如TC,TG,UA等)。另外,TBIL(重氮法)和DBIL(重氮法)生成的偶氮物在546 nm 下有吸收峰,因此TBIL(重氮法)或D-BIL(重氮法)会和TP相互干扰。

  2. ALB(BCG)检测原理是形成的蓝绿色复合物在578nm有强吸收,且在整个500nm-700nm都有较强吸收,因此ALB试剂会干扰紧随其后的500nm-700nm波段的终点法显色测定(如UA等)。 

  3. ALT的R2(含NADH)及 CR的R2试剂(苦味酸,呈深黄色)在340nm有很强的吸收,会干扰紧随其后的340nm免疫比浊终点法的测定(如PA,CRP等),且免疫比浊法的终点吸光度越低干扰越严重。           

该种类型的交叉污染无法分出是试剂针还是搅拌杆携带进的污染对测试结果的影响,是两者的综合影响。

另外一些文献报道:

ALT、AST、CK、CK-MB、Glu(GOD法和HK法)对TG有影响;

P对UA、CREA、D-bil(钒酸盐法)、D-bil(重氮法)有影响;

Glu(HK)、UA、UREA、CREA(JAFF)、TP对Ca有影响;

TP对Mg有影响;

CK、CK-MB、UA对P有影响。

TC、TG、HDL-C、LDL-C、Glu(GOD)、CREA(酶法)、UA反应过程中有H2O2,ALT、AST、CK、LDH、CK-MB、a-HBDH 、 Glu(HK)、UREA反应过程中有NADH,两类反应间可能发生氧化还原反应从而产生影响。

Mg试剂中含有EGTA,对Ca有影响。

CK、CK-MB中含有EDTA,对Ca、Mg有影响。

a-HBDH中含有碳酸盐,对Ca有影响。

CK、CK-MB中含有EDTA能螯合ALP试剂中的Mg离子,从而影响ALP的检测。


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