牛酮病的检验原理及操作步骤

1．尿的物理性质检查

盛被检尿于容器中，用手扇气嗅闻。牛患酮血病时，尿呈丙酸酮的臭味。

2．尿的酸碱度(pH)检查

(1) pH试纸法取pH试纸一小片，将一端浸入被检尿中，浸湿后取出，与标准色板进行比色，与此相同的颜色，就是该尿的pH。

(2)石蕊试纸法 用清洁的镊子夹一小片红或蓝色石蕊试纸，浸入被检尿中，浸湿后取出观察。如红色试纸变蓝则为碱性反应；蓝色试纸变红色则为酸性反应；红、蓝试纸都不变色则为中性。

牛尿液的pH为：7.7～8.7；犊牛尿液的pH为：7.0～8.3。

3．尿中酮体的检验

酮体是羟丁酸、乙酞乙酸和丙酸的总称。它们都是脂肪代谢的中间产物，当大量脂肪分解而导致这些物质氧化不全时，可使血中浓度增高而由尿排出，称为酮尿。

(1)郎(Lange)氏法原理：丙酮或乙酞乙酸与亚硝基铁氰化钠作用后，再与氨液接触可产生紫红色化合物。冰醋酸可抑制肌酐产生类似的反应，又叫接触环法。

试剂：亚硝基铁氰化钠、冰醋酸、浓氨水(28%)。

方法：取被检尿约2mL于小试管内，加入亚硝基铁氰化钠结晶数小粒，振荡使其溶解，再加冰醋酸0. 2mL（3～4滴），混匀后，将试管倾斜，沿管壁缓缓加入浓氨水0.5～1mL，在两液交界处呈现紫红色环即为阳性。根据颜色产生的时间，可做粗略的定量判断，立即出现深紫红色环(+++)、逐渐出现紫红色环(++)、10min内出现淡紫色环(+)、10min后不显色（一）。

(2)改良罗特拉(Rothera)氏法 原理：丙酮和乙酞乙酸在一定的pH环境中，与亚硝基铁氰化钠及硫酸铵作用，形成紫色化合物。

试剂：亚硝基铁氰化钠0. 5g、无水碳酸钠10g、硫酸铵20g。

将上述3种药物研磨均匀（不宜太细），贮于棕色瓶中备用。若放置过久变黄，说明失效。

方法：取粉剂约0.1g于载玻片上或反应盘内，加新鲜尿2～3滴使粉剂完全被尿液浸透。

结果判定：粉剂呈紫红色为阳性反应、5min后仍不显色者为阴性。根据显色快慢与色泽深浅亦可用（+→+++）号表示。