高效液相色谱法测定那如一5水丸胡椒碱含量
那如一5水丸为传统蒙药制剂，用于风湿痛、“协日”紊乱引起的脉络病与骨病。处方主要由荜茇、诃子、草乌等药材组成。药材粉碎后，制成水丸。本文对那如一5水丸胡椒碱含量进行测定，以期制定该药品含量标准。
1、仪器、试剂及药品
1.1高效液相色谱仪：1100型(美国Agilentg公司制造)；十万分之光电天平：TG332A型(湘仪制造)；超声清洗仪： AS2060B型(上海科学仪器公司制造)。
1.2色谱条件：色谱柱C8(4.6×150mm，5μm)；流动相：甲醇-水(77：23)；流速：lmL・min-1；柱温30°C。
试药：甲醇：色谱纯由美国Tedai公司生产；胡椒碱由中国药品生物制品检定所提供；那如一5水丸，由内蒙古自治区国家蒙药制剂中心生产。
2、方法与结果
2.1线性范围：精密称取干燥的胡椒碱对照品4.6mg置50mL量瓶中，加甲醇溶解至刻度，分别精密吸取1、2、3、4、5mL-1溶液置10mL量瓶中，加甲醇至刻度。浓度分别为9.2、18.4、27.6、36.8、46.0μg・mL，取10μL按色谱法条件测定。回归方程：Y=30510X一14255，r=0.999。
2.2供试品溶液制备：取那如一5水丸研成细粉，各取50mg加到50ml锥形瓶中，分别精密加入无水乙醇50ml，称重，超声提取30min，再称重，补足提取过程中损失量。用注射器过滤头过滤(O.45μm)，即得供试品溶液(在棕色瓶内保存)。
2.3精密度试验：取胡椒碱对照品溶液，按上述色谱条件测定，连续进样5次，结果为RSD=0.53％，复合测定要求。
2.4稳定性试验：取那如一5水丸供试品溶液，分别于O、2、8h进样，测定。测定结果表明，供试品溶液在8h内稳定。
2.5回收率试验：取已知胡椒碱含量的那如一5水丸样品25mg，分别精密加入胡椒碱对照品，按供试品制备方法提取，过滤。按色谱条件测定。计算5次测定平均回收率，结果见表1。
表1 那如一5水丸加样回收率测定
NO 样品含 胡椒碱 加入量 理论值 测得值 回收率 平均回收 RSD
量(mg) (mg) (mg) (mg) (mg％) (％) 率(％) (％)
1 25.O 0.25 0.21 0.46 0.45 97.8
2 25.O 0.25 0.23 0.48 0.47 97.9
3 25.0 0.25 0.23 0.48 0.48 100 98.3 1.O
4 25.O 0.25 0.22 0.47 0.46 97.8
5 25.O 0.25 0.20 0.45 0.44 97.8
2.6供试品含量测定：分别吸取对照品溶液与供试品溶液1叫，依上述色谱条件测定，计算那如一5水丸中胡椒碱含量，结果见表2。
表2 不同批次那如一5水丸胡椒碱含量测定
样品 胡椒碱含量(mg％) (μg/粒) x(_)
070230 0.51 0.51
070512 0.50 0.50
070821 0.54 0.54 0.52
