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质谱样本前处理步骤

2021.6.22

生物样品基质复杂,且待测目标物多为内源性的化合物,如血清样本含有蛋白质、多肽、氨基酸、脂类、糖类、无机盐、维生素、有机酸、激素等。因此为了降低基质干扰、延长色谱柱使用寿命、防止系统堵塞损坏、提高检测灵敏度和特异性,往往需要对样品进行沉淀、萃取、净化、富集等前处理。

 

目前常用的样本前处理方法有:蛋白沉淀法PPT,液液萃取法LLE,固相萃取法SPE等。可根据目标物的特性和样品的类型来选择合适的前处理方法。


(1)样品的沉淀(蛋白沉淀,选择合适的蛋白沉淀剂如乙腈、丙酮、甲醇、乙醇、异丙醇、酸等。)

(2)萃取、净化和富集(液液萃取、液固萃取、固相萃取、超滤等;旋转蒸发、氮气吹扫等。)极性较小的化合物可采用液液萃取的方法进行萃取,酸性、碱性以及其它极性较强的化合物大多需要经过固相萃取进行净化和富集。

(3)样品的衍生化(目标物响应信号差或极性太强等可采用衍生化法。)

样本量大,资金允许的实验室可考虑引进自动化前处理系统,如在线固相萃取系统Online SPE,但仍需考虑系统配备后的方法开发难度、设备维护、操作人员培训等诸多因素。


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