1.气泡溢出

流动相有气泡。关闭泵，打开安全阀，打开吹扫键，清洗脱气。气泡从过滤器中出来，进入流动相。无论吹扫键打开多少次，气泡都无法清除。过滤器长时间浸泡在醋酸铵缓冲液中的原因是，由于霉菌的生长和繁殖、细菌的形成、过滤器的堵塞，缓冲液很难顺利通过过滤器，空气压力下的泵通过过滤器进入流动相。通过超声波清洗，过滤器可以在5%硝酸溶液中浸泡几分钟；过滤器也可以在5%硝酸溶液中浸泡12-36小时，轻轻摇动几次，然后用纯水清洗几次过滤器，打开减压阀，打开d打开清洗键进行清洗和脱气。如果仍然有气泡不断地从过滤器中冒出，它将继续通过。当过滤器浸入5%硝酸溶液中时，如果过滤器连续不出气泡，说明过滤器内的结晶体已被硝酸破坏，流动相可顺利通过过滤器。打开减压阀，打开泵，调节流量为1.0×3.0mL/min，用纯水冲洗过滤器约1h。过滤器可以清洗。关闭减压阀，用纯甲醇冲洗半小时。

2.峰面积重复性不佳

（1）进样阀漏液。

（2）加样针不到位。

（3）液体不足。对于第一种情况，更换注射阀垫片；对于第二种情况，将注射针插入端部，样品溶液必须快速平稳地从负载转移到注射，以确保注射量的准确性。在日常工作中，高效液相色谱仪的维护是非常重要的，如注意不让空气进入输液系统和高压泵，如果长期不使用，应清洗和更换液体储集层中的溶液，每次使用高效液相色谱仪后应用纯净水冲洗缓冲液，以防止无机盐沉淀或沉淀。样品的预处理也是非常重要的。任何样品都应尽可能地除去杂质，完全溶解，尽量减少色谱柱的污染，以延长色谱柱的使用寿命，避免注入过量的样品溶液，以避免因固体在注入阀中沉淀而造成的堵塞。高效液相色谱仪的色谱柱必须有良好的标记，用于不同分析目的色谱柱不应混合，等等。

3.柱压高原因

（1）缓冲盐，如醋酸铵，沉积在柱中。

（2）污染沉积样品。在第一种情况下，用40×50℃纯水对柱进行低速冲洗。柱压逐渐降低，流速增大，柱压大幅度降低，然后用纯水在室温下洗涤，再用纯甲醇洗涤30 min。在第二种情况下，被样品沉积污染的C18柱用纯水反洗，然后用甲醇洗涤，然后用甲醇异丙醇(46)冲洗(清洗时间由样品的污染情况决定)，然后用甲醇冲洗，再用纯水冲洗，最后用甲醇冲洗30分钟以上。

4.既无压力指示，又无液体流过

（1）泵密封垫圈磨损。

（2）大量气泡进入泵体，在第一种情况下，更换密封垫圈；在第二种情况下，使用50毫升的玻璃注射器在泵工作时帮助泵出口处的空气。

5.压力波动大，流量不稳定

其原因是系统中的宝石球与空气或单向阀座之间存在异物，使两者无法密封。观察流动相在过程中的数量，确保不锈钢过滤器沉到储罐底部，避免吸入空气，移动相应完全除气。如果高效液相色谱仪的单向阀和阀座之间有异物,则拆下单向阀,将其放入含有丙酮的烧杯中,并用超声波清洗。

6.出峰不佳，峰分叉

（1）色谱柱被污染。

（2）柱塞填料塌陷。对于第一种情况，柱用纯净水冲洗，然后用甲醇异丙醇(46)冲洗(视样品的污染程度而定)，然后用甲醇洗涤，然后用纯水冲洗，然后用甲醇冲洗30分钟以上。例如，如果洗涤后峰仍不好，则应考虑第二种情况。在第二种情况下，拧下螺栓并检查填料是否硬化或塌陷。取出硬件（污染填料），填充新填料，滴一滴甲醇，填料下沉，然后填充，用与塔顶内径相同的光滑不锈钢棒压实，填充，滴甲醇，然后反复压实几次，直至完全填充。用甲醇冲高效液相色谱仪的色谱柱头部,擦拭高效液相色谱仪，色谱柱外壁的填料,拧紧头,用纯甲醇冲洗30分钟以上。