THP-1细胞培养时注意事项
THP-1细胞（ 人急性单核细胞白血病细胞）
规格：1×10^6/瓶 或1ml冻存管
细胞来源：ATCC
培养条件：RPMI-1640+10% FBS+0.05mM 2-巯基乙醇（货号：HN-FBS-500）
细胞特性：悬浮（单核细胞样）
温度：37℃ 气相：95%空气，5%二氧化碳
运输方式；复苏细胞常温运输/冻存细胞干冰运输
THP-1细胞（ 人急性单核细胞白血病细胞）传代：
1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代，一般2到3天换一次液；
2.待细胞长满瓶底面积80%-90%，需要对其进行传代，传代比例为1:3到1:6；
3.传代步骤：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（第一次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间，以便于下次消化），消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后收集细胞悬液，1200rpm离心3min，弃上清，加入完全培养基重悬细胞，进行传代。
THP-1细胞（ 人急性单核细胞白血病细胞）冻存：无血清细胞冻存液（货号：H-W-100）
THP-1细胞（ 人急性单核细胞白血病细胞）
注意事项：
1.该细胞对血清质量要求高，推荐使用HAKATA优等胎牛血清。
2.该细胞培养时需要添加0.05mM的β-巯基乙醇。
3.该细胞生长时，最高密度不能超过 1 X 106 cells/mL. 传代时可以2- 4 X 105 cells/mL的密度进行传代。
4.该细胞较难复苏，建议优先订购复苏好的细胞。而若是对冻存细胞进行复苏，冻存液融化后，应缓慢加入完全培养基，100-150g离心5min去除冻存液，并以20%血清浓度进行培养，并将T25培养瓶竖直放置直至细胞进入生长期。细胞状态正常之后，再恢复到10%的浓度。
5.该细胞培养时可能会有部分细胞聚团生长，若细胞团块过大过多，应当轻轻将其吹散。
