高效液相色谱仪流动相选择要求？
高效液相色谱仪流动相选择要求？
1.流动相的性质要求
液相色谱理想的流动相溶剂应具有粘度低、与检测器相容性好、易于获得纯产品、毒性低等特点。
选择流动相时应考虑以下方面:
流速不会改变填料的任何性质 离子交换树脂的低交联度和排斥色谱填料有时会使有机相发生一定的膨胀或收缩，从而改变填料床的性能。 碱性流动相不能用于硅胶柱系统 酸性流动相不能用作吸附剂如氧化铝和氧化镁的柱系统..
纯度液相色谱仪色谱柱的寿命与大量流动相的通过有关，尤其是当溶剂中的杂质积聚在色谱柱上时。
探测器必须与探测器匹配 当使用紫外检测器时，所用的移动相不应被检测波长吸收，或者吸收很小。 当使用差示折射检测器时，应选择折射率不同于样品的溶剂作为流动相，以提高灵敏度。
应降低初始粘度（ 高粘度溶剂会影响溶质扩散和传质，降低塔效率，增加塔压降，延长分离时间。 优选选择沸点低于100度的流动相。 C.
_样品溶解度应合适 如果溶解度不好，样品将在色谱柱中沉淀，这不仅影响纯化和分离，还会使色谱柱劣化。
_样品易于回收 应选择挥发性溶剂
2、流动相
当弱酸（3≤pKa≤7）或弱碱（7≤pKa≤8）样品用反相色谱分离时，通过调节流动相的酸碱度抑制样品组分的分离，增加组分在固定相的保留，改善峰形，这就是所谓的反相离子抑制技术。 对于弱酸，流动相的酸碱度越小，组分的钾值就越大 当酸碱度远低于弱酸的pka值时，弱酸主要以分子形式存在，而弱碱则相反。 在弱酸样品的分析中，向流动相中加入少量弱酸，通常为50 m mol/L磷酸盐缓冲液和1％乙酸溶液。在弱碱样品的分析中，通常向流动相中加入少量弱碱、50 m mol/L磷酸盐缓冲液和30 m mol/L三乙胺溶液
注:流动相中有机胺的加入可以减少碱性溶质与残留硅烷醇基之间的强相互作用，减少或消除峰尾现象,在这种情况下，有机胺（例如三乙胺）也被称为拖尾剂或拖尾剂
流动相选择方法
1:由强到弱:一般采用90％乙腈（或甲醇）/水（或缓冲液）进行测试，以快速获得分离结果，然后根据峰条件调整有机溶剂（乙腈或甲醇）的比例
2: 3x定律:有机溶剂（甲醇或乙腈）量每减少10％，保留系数增加约3倍，约为定律的3倍。 这是一种聪明省力的方法。 在调整过程中，注意各峰的分离。
3:粗调和精调:当分离达到一定程度时，将10％有机溶剂的变化调整到5％ 根据这一规则，调整率应逐渐降低，直到每个部件的分离不再改变。
