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霉菌的培养和观察

2021.11.10

(一) 实验材料         根霉,毛霉,黑曲霉,青霉,土豆琼脂培养基,培养皿,载玻片,盖玻片,镊子,显微镜,小刀,U形管等。 (二) 实验步骤           1、配置培养基:根据原料用量配置土豆培养基。配置时,先急火煮沸,在温火加热20min,若有浑浊出现,则需过滤,然后定容。包扎土豆培养基,甘油等其他用品。灭菌后取出备用2、培养小室准备及灭菌 在培养皿底部铺一张略小于皿底的圆形滤纸片,滤纸片上依次放上“U”形载玻片搁架、载玻片、盖玻片-四片,盖上皿盖,牛皮纸包扎,于恒温干燥箱中121℃灭菌30min烘干备用;         2、琼脂薄片制作:a) 将稍微冷却的培养基,倒在培养皿 中,做成薄平板。培养基应该要倒 得薄而均匀。注意无菌操作。b) 用解剖刀将琼脂薄平板切成边长不大于1cm的琼脂薄片c) 用解剖刀将琼脂薄片移至小室载玻片上(一个载玻片上方两块薄片)          3、取菌接种:用接种环挑取少量待观察的霉菌孢子(霉菌菌种的表面轻轻刮取即可),接种于固体培养基边缘,以便于霉菌生长。接种时只要将带菌的接种环在载玻片上轻轻碰几下即可。接种量要少,以免培养后菌丝过于稠密而影响观察。          4、加盖玻片:用无菌镊子将皿内的盖玻片盖在琼脂薄层上,用镊子轻压盖玻片,使盖玻片和载玻片之间的距离相当接近,但不能压扁。盖玻片不能紧贴载玻片,要彼此留有小缝隙,一是为了通气,二是使各部分结构平行排列,易于观察。         5、倒保湿剂:每皿倒入约2-3mL 20%的经灭菌处理的甘油,使皿内滤纸完全湿润,以保持皿内湿度,盖上皿盖。制成载玻片湿室。         6、正置培养:将平皿置于27℃霉菌培养箱中培养一周。         7、观察: 将培养好的载玻片取出,置于显微镜下直接观察。 (三)实验结果及分析 实验结果 1.根霉:菌丝无隔,有假根、匍匐菌丝。假根着生处有向上直立的孢囊梗,其顶端膨大成孢子囊,底部为半球形囊轴。2.毛霉:孢囊梗直接由菌丝出,顶端为球形孢子囊 3.黑曲霉:菌丝有隔,气生菌丝分化为分生孢子梗(无隔),顶端 膨胀为球状顶囊。4.青霉:菌丝有隔,分生孢子梗顶端不膨大,无顶囊,多次分枝成几轮小梗,小梗顶端长孢子。分生孢子梗呈扫帚状。

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