操作步骤

1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3. 样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。

4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

鱼雌激素受体ELISA试剂盒操作方法技术检测范围试剂盒性能

• 检测范围：12.5 pg/mL – 400 pg/mL。

• 灵敏度：最低检测浓度小于1.0 pg/mL。

• 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

• 重复性：板内变异系数小于10% ，板间变异系数小于15% 。

试剂盒组成

备注：

1. 标准品浓度依次为：400、200、100、50、25、12.5 pg/mL

2. 经过大量正常标本检验，标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内，实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过最大标准品浓度时，可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。

注意事项

• 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。

• 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。

• 消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。

• 底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。

• 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。

• 在储存和温育时避免强光直接照射。

• 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

• 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。

• 不能使用过期产品。

• 如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。