蜂蜜含量的色谱检测
蜂蜜是蜜蜂从开花植物的花中采得的花蜜在蜂巢中酿制的蜜。蜜蜂从植物的花中采取含水量约为75%的花蜜或分泌物，存入自己第二个胃中，在体内多种转化的作用下，经过15天左右反复酝酿各种维生素、矿物质和氨基酸丰富到一定的数值时，同时把花蜜中的多糖转变成人体可直接吸收的单糖葡萄糖、果糖，水分含量少于23%存贮到巢洞中，用蜂蜡密封。蜂蜜是糖的过饱和溶液，低温时会产生结晶，生成结晶的是葡萄糖，不产生结晶的部分主要是果糖。
5-HMF由葡萄糖或果糖脱水生成，分子中含有一个呋喃环，一个醛基和一个羟甲基，其化学性质比较活泼，可以通过氧化、氢化和缩合等反应制备多种衍生物，是重要的精细化工原料。
《中国药典》中采用液相色谱法分析检测蜂蜜中的5-HMF，作为测定蜂蜜含量的质量评价依据，实验以乙腈-0.1%甲酸为流动相，用鸟苷作为定位物质。
液相色谱系统（济南上地电子科技有限公司）由高压恒流泵与UV紫外检测器直接构成等度分析系统。使用专业工作站可以同时控制高压恒流泵、紫外检测器及恒温柱箱等，具备多元高压洗脱、波长扫描等功能。广泛应用于研究开发、医药检验、食品检测、化工分析、环境监测等众多分析领域。
样品准备：取样品1 g，置于烧杯中，精密称定，加10%甲醇适量溶解，并分次转移至50 mL量瓶中，精密加入鸟苷对照品溶液1 mL，加10%甲醇至刻度，摇匀即得。
实验步骤：精密吸取待测液10 μL进样，领取鸟苷对照品溶液，5-HMF对照品溶液各10 μL进样，用以确定样品色谱图中5-HMF及鸟苷的色谱峰，进行计算。
色谱条件：
色谱柱 | InertSustain AQ-C18（4.6×250mm，5μm） |
流动相 | 乙腈-0.1%甲酸（V/V，5:95） |
柱温 | 35℃ |
检测波长 | 284 nm，254 nm |
流速 | 1.0 ml/min |
进样量 | 10 μL |
