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高效液相色谱柱在作样前和作样后如何平衡

2022.1.14

一般说的液相色谱柱多指的是反相色谱柱。反相色谱柱比如C18、C8、苯基柱等等。
这些柱子保存在有机相中,比如甲醇、乙腈里面比较好,所以封存的时候大多用甲醇或者乙腈封存色谱柱。而反相的流动相大多数都是缓冲盐的溶液,这些无机盐溶液在纯有机相中容易析晶,所以中间会有一个10%的甲醇水(或乙腈水)作为缓冲。
所以每次使用前:先用1.0ml/min的流速冲洗30min的10%甲醇水,然后上流动相平衡,大约30min基线跑平了就可以进样了。
每次使用后:同样冲洗30min的10%甲醇水,把流动相里面的缓冲盐冲洗掉,然后用甲醇冲洗30min封存。
其中的30min是大约10倍的色谱柱柱体积,针对的是比较常见的250mm*4.6mm内径的柱子,如果你用的是使用的是150mm或者100mm的短柱,可以根据柱长和柱内径计算柱体积。πr^2*柱长。

如果色谱柱是正相,因为正相色谱的流动相里没有无机盐,所以就没有中间那个过渡了。可以直接冲洗流动相进行平衡了。使用结束之后直接用规定的正相溶液封存就可以了。

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