使用色谱法分离蛋白质的相关内容

　　许多类型的矩阵可以在市场上获取，离子交换柱中充满了携带正电荷或负电荷小珠子，因此蛋白质能够根据其表面电荷的排列进行分类。疏水柱中填充有突出的疏水边链的小珠子，选择性地阻碍暴露疏水区域的蛋白质。根据蛋白质的尺寸对蛋白质进行分类的凝胶过滤柱，填充着微小的多孔珠：当它们通过柱子时，足够小的能够进入气孔的分子在连续的微珠之间徘徊，而较大的珠则留在溶液中并在珠子之间流动，从而移动的更为迅速，首先从柱子从浮现出来。除了提供分离蛋白质的手段之外，凝胶过滤层析法也是确定它们大小的便利方式。

　　另外，基质的不均匀性，会使得溶液通过柱子时具有不均匀流动，限制了常规柱层析法的解析度。特殊的层析树脂是由直径3-10微米的小球组成的，这些树脂可以用特殊的装置填充以形成均匀的柱床。这些高效液相层析能够获得很高的解析度。在高效液相色谱中，溶液与内部的微球平衡地非常迅速，即使在非常快的流速下，对基质具有不同亲和力的溶液也能够有效分离。因此，高效液相层析是目前分离蛋白质和小型分子的首选方法。它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀，小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力，需用高压输送流动相。