关于cDNA文库的原理介绍

　　一、定义

　　（cDNA Library）某种生物基因组转录的全部mRNA经反转录产生的cDNA片段分别与克隆载体重组，并将其引入到相应的宿主细胞中（一般为E.coli.）繁殖和扩增，理论上此群体就包含有该物种的全部mRNA信息，称该生物基因组的cDNA文库。

　　二、原理

　　经典cDNA文库构建的基本原理：用Oligo（dT）作逆转录引物，或者用随机引物，给所合成的cDNA 加上适当的连接接头，连接到适当的载体中获得cDNA文库。其基本步骤包括：

　　（1）mRNA的提纯获取高质量的mRNA是构建高质量的cDNA文库的关键步骤之一。

　　（2）cDNA第一条链的合成。

　　（3）cDNA第二条链的合成。

　　（4）双链cDNA的修饰。

　　（5）双链cDNA的分子克隆。

　　（6）cDNA文库的扩增。

　　（7）cDNA文库鉴定评价。